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标题:[讨论帖]养平滑肌细胞及内皮细胞的群友请进

伊莎贝拉[使用道具]
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发表于 2011-12-10 14:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我做的是大鼠肺动脉平滑肌细胞培养，今天第一次做，还不知会如何，但感觉取材很麻烦，而且外膜＼内膜也不知道有没有剥干净，只是用刀片刮了几下，我用的培养皿培养原代，我看大家都用的培养瓶，会有什么不同吗？理论上说要把内膜面向下，可是剪完也分不清正反了，就随便放了
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eric930[使用道具]
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发表于 2011-12-10 14:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我是新手，请多关照！
我即将养原代,大鼠主动脉平滑肌,请问哪种胶原酶比较好?一般消化多长时间?
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mickeylin[使用道具]
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发表于 2011-12-10 14:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我养的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,各位师兄师姐有好的建议,能否指导,我用的组织块贴壁,已有8天了,仍未见血管平滑肌细胞爬出,不知是何原因?组织块也没浮起来!
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pengke1983[使用道具]
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发表于 2011-12-10 14:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

各位师兄师姐:

我做RT-PCR,怎样把血管平滑肌细胞调整
细胞调整在G1期,G1中期,G1/S期,S期,G2期来表达基因情况变化,又怎样标时相点,具体药物浓度及剂量、时间怎样,请高手指导,多谢!
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发表于 2011-12-10 14:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我准备要养牛脑血管内皮细胞，在广州。pm我就可以了

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朋友，我就要毕业，所用ECV304上当了，只有再找牛或鼠的血管内皮细胞，能否惠赠，购买，或提供相关购买信息，非常感谢，加急
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西子[使用道具]
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发表于 2011-12-10 14:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我做的是元代培养的支气管平滑肌细胞,太难了！请问各位有内有知道这种细胞可不可以购买啊！
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薄荷侠[使用道具]
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发表于 2011-12-10 14:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我现在正在养平滑肌和内皮细胞。
对于脐动脉平滑肌细胞采用植块培养法。分离外膜已经没问题，可怎样才能将内膜刮干净呢？
脐静脉内皮细胞采用消化法，具体如下：取回脐带20cm，找到静脉，一端接16号针注射器，PBS冲洗至流出液体清澈。用止血钳夹住另一端注入0.25％胰酶8ml，37度消化15～20min。抽出消化液，用含20％胎牛血清的培养基中止消化，1000r/min，8min离心。弃上清，用含20％胎牛血清的培养基悬浮沉淀，接种于培养瓶。
可是得到的细胞数目很少。书上说7天可扑满瓶底，我的已养15天了，前几天还可见少量细胞，今天满视野多是小黑点。难道细胞死了？
脐动脉内皮细胞采用植块法。第一天，细胞爬出得蛮多，第三天将组织块吸出。今天是第7天，满视野也是小黑点。这是怎麽回事？？
请大家多多指教.
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bohe221[使用道具]
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发表于 2011-12-10 15:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请养平滑肌细胞的高手指点:
我养大鼠血管平滑肌细胞,DMEM(高糖)系GIBCO产品,血清也是澳大利亚进口分装的,试剂配制也没有问题.我师兄与我是同样试剂,也是一起配制的.他的细胞长的很好,而我的却不长.不知什么原因,现在好着急.请高手指点.
谢谢!!
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发表于 2011-12-10 15:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我现在正在养平滑肌和内皮细胞。

脐静脉内皮细胞采用消化法，具体如下：取回脐带20cm，找到静脉，一端接16号针注射器，PBS冲洗至流出液体清澈。用止血钳夹住另一端注入0.25％胰酶8ml，37度消化15～20min。

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我们用胶原酶消化，长的挺好的

我也养平滑肌和内皮细胞，大鼠的胸主动脉平滑肌和人的脐静脉内皮，感觉内皮比平滑肌好长多了@_@
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 小中大

有没有人养过小鼠内皮？
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