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标题:[求助]大鼠乳鼠心肌细胞培养

生物迷[使用道具]
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发表于 2011-12-15 16:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
高倍镜下的图片


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2011-12-15 16:07
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发表于 2011-12-15 16:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
对以上两张照片群友的回答是：这一张是真菌感染，看见其中的两个连在一起的花生样的东东了吗？那就是串珠样的真菌。参见帖子：
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=745728&sty=2&age=0&tpg=1&ppg=9#745728')
期待其他群友能给出肯定的回答，解决共同存在的问题。
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发表于 2011-12-15 16:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
还有一张，


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2011-12-15 16:08
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雪山飞鹿[使用道具]
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发表于 2011-12-15 16:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我昨天很认真的又做了一次，尤其是在终止消化时加足了培养基，先取出的放4度冰箱，最后一起离心了。这次的细胞密度不大，平均0.5×10的6次方/mL.
可是，今天去观察细胞，又发黑了，就像上面照片一样，发黑的量约有1/2，一下子，我的心就凉了。
我不知道错在哪里，你帮我分析一下吧！
谢谢啦！
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雪山飞鹿[使用道具]
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发表于 2011-12-15 16:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我今天看了，照图片的细胞，是细胞核看起来黑，但没有那种絮絮状的漂浮物。我想着应该不是污染。因为细胞没有溶解，并且搏动很好，培养基的颜色没有明显变成橙汁样颜色，现在一直养着，已经养了将近10天了，仍然是这个样子。
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发表于 2011-12-15 16:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你先继续养着看看有何变化，我在去年冬天做的时候没出现过这种情况，但这三个月来也出现了你这样的情况，当时也分析了好多原因，至今不解，你那里的气候怎样，我在南方，这阶段是培养细胞最不好的季节，实验室培养箱的搁板不到一周就可以看到很多灰绿色的霉菌菌落，空气中的湿度也大，也只能勤擦孵箱，至少每周一次。
操作过程方面既然能培养出搏动的心肌细胞应该没有问题，要注意的还是无菌操作。尽管这么说可自己不弄不来，不知道那次就会出现。
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生物迷[使用道具]
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发表于 2011-12-15 16:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #45 雪山飞鹿 的帖子

如果是这样，你可以继续你下一步的实验看看有无结果，希望不是个馊主意。
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发表于 2011-12-15 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你也碰到这情况啦！
这样想来有可能是污染了。我在湖北，这里也很热，都30多度了。
我也许是无菌操作不够规范吧！明天我再试试。
那我把东西重新更换下。
谢了！
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发表于 2011-12-15 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
最近我又做了一次原代,我这一次消化得比较彻底,但是我发现不管怎样消化和吹打,都不能完全把细胞分离成单个细胞(当然大部分已消化单个细胞),我还是可以看见比较小的细胞团,它贴壁后还成圆形,但是它周围爬出来的细胞都是不规则形状的.这次培养不到24小时就可以看见那些小的细胞团已经开始搏动,但是单个细胞搏动的状态依然不是很好,不知道为什么?
各位高手帮帮忙啦!
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dragonkilly[使用道具]
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发表于 2011-12-15 16:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我还想请教一下,在心肌细胞培养过程中,哪些细胞是成纤维细胞?刚开始培养几天,细胞还挺干净,可是心肌细胞长大以后就很难辨别了,有没有高手可以结合你们培养的心肌细胞图片给我讲解一下呀!现在我见到的基本是不规则形状的双核细胞!
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