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标题:[讨论帖]巨噬细胞RAW264.7的经验总结

abc816[使用道具]
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发表于 2011-12-15 17:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #40 jujuba 的帖子

血清浓度太低了，另外你还是要注意细胞的生长密度。细胞圆圆的是正常状态，成梭形也是其正常状态，一般细胞呈梭形的比较多的话就提示你该传代了，这个细胞贴壁久了就会有圆形伸出触角成梭形。。
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薄荷侠[使用道具]
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发表于 2011-12-15 17:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果这个细胞传完代之后几个小时之内还有要贴壁的迹象，可是隔夜之后就开始浮起来，再养一天就看起来跟悬浮细胞一样，是什么原因呢？
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一叶[使用道具]
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发表于 2011-12-15 17:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #43 薄荷侠 的帖子

悬浮起来基本就要死了，不能再要了，对后面的实验不利。你要把他换液换掉。
细胞浮起来，你要考虑你的培养条件。刚开始贴壁，证明细胞是正常的，而隔夜浮起来，那就是趋于死亡。你的培养基有问题，或者是其他培养条件有问题。
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flower-201[使用道具]
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发表于 2011-12-15 17:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
看ATCC上是用DMEM啊
最近做这个细胞，长的的确快。可是我养的很少扎堆啊，都很独立，除非是点的太稀了，就会一堆一堆的。
还有形态，我是直接用刮子刮的，刚刮下来形态都很好，可是一段时间后就会长出触角神马的，再长一段时间比较满了，大概70,80%的样子反而又圆了，这是咋回事啊
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小鱼鱼[使用道具]
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发表于 2011-12-15 17:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

cuturl('http://www.atcc.org/ATCCAdvancedCatalogSearch/ProductDetails/tabid/452/Default.aspx?ATCCNum=TIB-71&Template=cellBiology')
今天无意去ATCC看了一下，RAW264.7的推荐培养基换成了DMEM！
各位同学在养它时加不加HEPES?浓度是？
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nn255[使用道具]
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发表于 2011-12-15 17:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我在养RAW264.7,准备将其诱导为破骨细胞，看到有人配制破骨细胞诱导液ex， 1，25（OH
)2VD3,请问一下有人用过这种方法吗？？1，25（OH)2VD3如何获得，谢谢指教
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2011-12-15 17:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
看ATCC上是用DMEM啊
最近做这个细胞，长的的确快。可是我养的很少扎堆啊，都很独立，除非是点的太稀了，就会一堆一堆的。
还有形态，我是直接用刮子刮的，刚刮下来形态都很好，可是一段时间后就会长出触角神马的，再长一段时间比较满了，大概70,80%的样子反而又圆了，这是咋回事啊

=====================================

呵呵，差不多吧，干嘛要用刮子啊，很伤细胞。
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2011-12-15 17:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
cuturl('http://www.atcc.org/ATCCAdvancedCatalogSearch/ProductDetails/tabid/452/Default.aspx?ATCCNum=TIB-71&Template=cellBiology')
今天无意去ATCC看了一下，RAW264.7的推荐培养基换成了DMEM！
各位同学在养它时加不加HEPES?浓度是？

===========================

1640完全没问题的。dmem更好。
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hot_hot_hot[使用道具]
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发表于 2011-12-15 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
听师兄说用物理方法比用消化液对细胞的伤害小呢。。。
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北风那个吹[使用道具]
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发表于 2011-12-15 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
开始养这个细胞了，就是觉得贴壁快，长的快，难消化，哎，0.25%胰酶37度10多分钟还有好多没消化下来，索性当留种的了……不知道明天会咋样，加长消化时间吧，又有先被消化下来的了，怕消化久了，对这些细胞也不好……很难搞啊
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