细胞世界

我们这边消化是用冷的含0.05%EDTA的PBS，消化2分钟左右，很容易消化下来，状态也很稳定，只是传代时吹打力度要轻柔，机械力也会对细胞产生影响，导致触角。

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的确，PBS洗一洗，消化一下就很轻松的吹下来了。

我们这边消化是用冷的含0.05%EDTA的PBS，消化2分钟左右，很容易消化下来，状态也很稳定，只是传代时吹打力度要轻柔，机械力也会对细胞产生影响，导致触角。

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的确，PBS洗一洗，消化一下就很轻松的吹下来了。

现在很迷茫了，到底是刮刀好，还是消化好？

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你自己亲自试试，对比一下试验结果不就知道了。用得着在这郁闷么？实验要亲自做啊。

在论坛看到很多筒子养过RAW264.7，我现在在用脂多糖诱导RAW264.7建立细胞炎症模型，然后用ELISA测细胞分泌的前列腺素E2.现在出了点问题，我做ELISA时标曲的显色很正常，可是我的样品几乎都没有颜色。。。以下是我的细胞培养步骤
小鼠巨噬细胞按细胞浓度为100000 个/mL接种到24孔板，待生长密度为60%时更换为无血清培养基进行同步化；待密度为80%时换液，并分为如下两个组别：对照组（只加培养基），脂多糖组（浓度为10μg/mL），于37℃下5%CO2培养24h，实验结束后取上清3000r/min离心5min，取上清进行测定（即取即测）。我用的培养基是DMEM高糖培养基，有酚红。因为不检测COX酶活性，所以没加花生四烯酸（也试过加，同样没有显色。。。）
相向各位大虾请教，究竟是我的培养过程出了问题，还是试剂盒有问题？脂多糖的诱导应该是成功的，因为同时做的一氧化氮检测显示脂多糖组一氧化氮的浓度很高。。。

现在实验卡住，又要找工作，实在是不知道如何解决啊 请各位指教。。。

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不要着急，哥们，这个我也出现过。建议你更换试剂盒，我用的是罗氏的试剂盒，进口的。
还有可能就是你把细胞一定要培养好做实验。结果比较灵敏。

我的RAW264.7消化两个小时都不会掉下来，现在我都加三毫升胰酶消化15-20min,然后直接用那三毫升胰酶来吹打细胞，就算这样还是很难吹

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1，你吹打的工具不行，力度不够。
2，你的胰酶不行。

是啊，我换了试剂盒又做了两次，结果很很好啊。就是那个试剂盒的问题。

纠正一下，确实是很好养的，我养其它的细胞做实验一难的不能做的时候，就那这个来玩玩，信心立马倍增啊，然后就所向披靡了。哈哈。这个Raw264.7是我的福将来的。呵呵。

唉给个破烂试剂盒拖了进度，新换的还是这样就杯具了，贪便宜的下场，唉

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检测PGE2我就遇到一次不好的，就是试剂盒有问题，换了就好了。
但是我做PLA2的活性检测就遇到了怎么都检测不出来，最后换成了检测它的量。。。最后发现活性检测的试剂盒过期啦，哇靠，气炸我了。真想@#@#@#@#！