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标题:[求助]关于ＭＴＴ测药物半抑制率的困惑

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发表于 2011-12-16 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1、在低浓度时OD值高于对照是可能的，不过你的高出了太多了。你试验中每孔的终体积是否一致？
2、建议你药物浓度设置在6-18之间，多设几个点，超出此范围好象意义不大。
GOOD LUCK!
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发表于 2011-12-16 17:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1、在低浓度时OD值高于对照是可能的，不过你的高出了太多了。你试验中每孔的终体积是否一致？
2、建议你药物浓度设置在6-18之间，多设几个点，超出此范围好象意义不大。
GOOD LUCK!

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恩，每孔终体积都是一致的
我试试，这是在加药后24小时测值就死光光了。很多次实验都是低浓度值很奇怪，再不行我就要研究此药在低浓度时促进癌细胞增殖的机理了。

我试着将血清浓度降低

刚把血球计数板摔了，郁闷，还不知道where 可以买到
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发表于 2011-12-16 17:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1、你的药物是用什么配的？是不是培养基？药液体积占终体积多少？
2、24小时后镜下观察一下是否细胞污染了？
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发表于 2011-12-16 17:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #39 one 的帖子

药物是用1640培养基配置的，药液体积占终体积是3/5 。按你说的，150ul药液(母液50ug/ml)加入100ug/ml前天种板的细胞中，这就是终浓度为30ug/ml 了

2，观察过，生长状态良好啊
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发表于 2011-12-16 17:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #40 +小生怕怕+ 的帖子

加药时，对照孔有没有补加培养基？
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发表于 2011-12-16 17:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问one，我加的药品里面含有抗氧化剂，在加MTT测定之前，是不是需要把细胞冲洗一下？如果需要，应该怎样操作呢？我培养的细胞是半贴壁细胞。谢谢先！
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发表于 2011-12-16 17:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #42 缘yuan 的帖子

半贴壁细胞是不能洗的，也没法洗啊。
样品中的抗氧化剂是你考察的对象还是为了样品的稳定而添加的？
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缘yuan[使用道具]
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发表于 2011-12-16 17:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

准确的说应该是抗氧化成分，是考察对象。
另外，我在用过氧化氢作氧化损伤处理后，用MTT法测得的数值也不太正常。是不是因为过氧化氢的氧化作用对MTT有干扰？如果有，应该怎样设法去除这种干扰呢？
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发表于 2011-12-16 17:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
加药时，对照孔有没有补加培养基？

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补加了呀，不补加的话对照孔和加药孔液体量相差太大，这个一眼就可以看出来的
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发表于 2011-12-16 17:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
过氧化氢损伤的是细胞线粒体，而MTT法反映的也是线粒的功能。
如果条件允许你换CCK-8试试看。
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