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标题:[求助]请高手鉴定破骨细胞

fei1226com[使用道具]
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感谢群友指教!我昨天去书店看了一看,似乎书上写的方法中都会在培养基中加1,25-(OH)2D3诱导了,看样子我需要进一步改进了。还有,你能买得到萘酚AS-BI磷酸钠吗?还是直接使用的TRAP试剂盒呢?是不是医院都会有钢尺锯呢?
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bamboo16[使用道具]
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机械长骨分离法得到的成熟的破骨细胞是osteoclast,而通过各种生长因子直接或者间接得到巨噬细胞击落刺激因子或者rankle,从而诱导单核细胞融合形成的多核细胞称为osteoclalstlike cell,这两种细胞都可以对三种鉴定方法显示阳性结果。有师兄告诉我说osteoclastlike cell的某些蛋白质不表达,但是我没有看到相关文献,也没有特意去查找。不知大家对这个问题怎么看?
不好意思,我不知道萘酚AS-BI磷酸钠的用处,也没有购买了。trap染色我打算让别人做了,自己做一下骨吸收实验就好了,trap有专门的试剂盒,但是好像比较贵,可以自己配置,好像也不是特别复杂。
钢尺锯骨科应该有吧。
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fei1226com[使用道具]
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谢谢群友回复,我现在快被这个实验弄晕了,以前都没接触过,课题设计方面也有些困难。我还想检测m RANKL的表达呢,复杂吗?
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fei1226com[使用道具]
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是RANKL的mRNA表达,写错了。
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bamboo16[使用道具]
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不好意思,我对rankle了解不多,不能给你有益的建议。
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园丁##[使用道具]
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They are not typical osteoclasts.
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fei1226com[使用道具]
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真的吗?那是什么细胞呢?请您指点!
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园丁##[使用道具]
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我指的是你贴出来的图片.你的图片中的细胞是破骨细胞,但最好采用TRAP染色,颜色会非常漂亮.
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fei1226com[使用道具]
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感谢您的建议,我最近在购买AS-BI磷酸盐时遇到问题,买不到,可能要买试剂盒了,对了,您知道怎么卖吗?还有,我贴出来的图片是我早期作出来的破骨细胞,染色很不成功,但是确实是经过那样变成最后你看到的多核图片的。请继续指教!不胜感谢!我还有很多问题想问您!
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园丁##[使用道具]
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2007-01-10 21:54照的是两个大气泡, 2007-01-10 22:04和2007-01-10 22:07的大细胞不能肯定,2007-01-10 22:09和2007-01-10 22:17确实是破骨细胞,2007-01-10 22:11和2007-01-10 22:15看不清楚是什么细胞.建议采用自制TRAP染液染色,在一般光学显微镜下鉴定.如果有条件,可兼用DAPI对细胞核染色,用荧光显微镜检查.

如果从Sigma买试剂合,染出来的颜色就和东方朔(2007-01-11 17:12)贴上来的照片一样,极不好看.

另外,2007-01-16 16:48的照片染上色的细胞不一定是多核,但凭经验应该是破骨细胞.因为osteoclast precusors也表达mature osteoclast的一些specific markers, 比如TRAP.
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