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标题:[讨论帖]总结了一下支原体感染和细胞小黑点的问题

乌贼老弟[使用道具]
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发表于 2011-12-19 17:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

首先要纠正一下楼主的提法，支原体不属于原虫。支原体污染细胞培养物确实很常见，也很烦恼。显微镜下有类似楼主所说的细胞间小黑点，甚至还会抖动。我参照英国干细胞库实验室检测支原体污染的通用型核酸引物检测16S rRNA基因，结果发现细胞是在引入实验室后培养的过程中污染支原体，而培养液和血清都没问题，说明实验室环境和实验操作有问题。
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生物迷[使用道具]
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发表于 2011-12-19 17:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

今天在养的细胞里发现了好多小黑点，以前没有注意，还在奇怪为什么细胞长得特别慢……今天加了左氧氟沙星到培养液里面，也换了新的培养瓶，希望能够有效吧！
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发表于 2011-12-19 17:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们也遇到了这种情况，实验室的师兄推荐用环丙沙星。效果还可以
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发表于 2011-12-19 17:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那用的浓度是多少呢？效果怎么样？
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glass[使用道具]
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发表于 2011-12-19 17:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
首先要纠正一下楼主的提法，支原体不属于原虫。支原体污染细胞培养物确实很常见，也很烦恼。显微镜下有类似楼主所说的细胞间小黑点，甚至还会抖动。我参照英国干细胞库实验室检测支原体污染的通用型核酸引物检测16S rRNA基因，结果发现细胞是在引入实验室后培养的过程中污染支原体，而培养液和血清都没问题，说明实验室环境和实验操作有问题。

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这位兄弟能否提供下支原体16S rRNA通用引物的文献或资料。
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TAT[使用道具]
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发表于 2011-12-19 17:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我想问下，有人知道白色念珠菌污染怎么办么~~~***帮助啊~~~
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dragonkilly[使用道具]
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发表于 2011-12-19 17:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我很赞同楼主的意见，我主要从事支原体研究。
我用ATCC培养基培养过的细胞污染物中，菌落大小不一。可能还有对培养基不适应的一些没有培养成功的。实际上，不仅仅是鼠支原体，还有无胆甾原体、猪鼻支原体、植原体、口腔支原体和精氨酸支原体等等，还有挑单克隆测序时，还发现比对为未鉴定的支原体种类。所以，种类繁多。
图片跟楼主见到的一样。我们还做过很多支原体的细胞粘附实验，其实很多支原体（体型胖的更明显）在10倍镜下就可见的。并不是很小。
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发表于 2011-12-19 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

在一天的时间内就从刚开始的一点点增加到很多更多，换液培养不到一天就有白色沉淀出现，细胞是别的实验室赠送邮寄过来的，在他们实验室培养时没有问题，但是到我们这里就有问题了，不知道是什么原因，看前面的帖有说是杀动物引起的鼠支原体，但是我们杀老鼠的超净台和做细胞的超净台不是同一台，这样也会引入污染源吗？如果真的出现污染了要如何救治呢？大家帮帮忙~~


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dragonkilly[使用道具]
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发表于 2011-12-19 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
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dragonkilly[使用道具]
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 小中大
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