细胞世界

黑胶虫没碰到的时候，大家都不承认，但是见识过之后才知道，有些东西不是我们能解释的。
开始的时候，细胞间只是见到黑点一样的杂质，细胞状态一般，如果勤换液，能维持住细胞状态，但是只要发现做布朗运动的黑点，那么细胞的寿命也就到头了。我们尝试过各种方法，以下方法略微有些作用：
1、勤换培养液。最好是一天一换，虽然影响细胞生长，但是能挽救他们的生命。
2、每次传代的时候离心，1000转以上。每次离心可以大量的减少杂质，细胞状态明显好转。
3、早传，早冻，多留火种。每次复苏的细胞开始几天状态都还是可以的，这样很多试验抓紧时间就可以完成了！
另外，很多同学倾向于是支原体感染，但是我们用过抗支原体的方法，效果一般。其实还有最重要的一点，用心养细胞，别当作是负担，彼此多熟悉，时间长了，摸准它的脾气，就好对付了！！！

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"每次复苏的细胞开始几天状态都还是可以的，这样很多试验抓紧时间就可以完成了！"
因为我的细胞也是细胞间出现了很多黑点，还会聚集增殖，我想问一下用这样的细胞做出来的实验有可信度吗？

PCR结果是支原体阳性的。

采集的标本是消化过的细胞，离心后弃上清，常规提取DNA，用支原体16s和23s之间的区段为目的片段，第一轮PCR，巢式引物的外层引物对就已经扩增很亮的条带。

（支原体附着在细胞表面，通过特异膜蛋白附着，所以扩增培养液上清和扩增离心洗涤后的细胞提取的DNA都可以）

目前PCR产物送公司克隆测序，看是不是动物源性的支原体。

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支原体检测不是用试剂盒就可以监测得出来吗？

我想问下，有人知道白色念珠菌污染怎么办么~~~***帮助啊~~~

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你可以试下换液，往培养液里加入两性霉素B。

我很赞同楼主的意见，我主要从事支原体研究。
我用ATCC培养基培养过的细胞污染物中，菌落大小不一。可能还有对培养基不适应的一些没有培养成功的。实际上，不仅仅是鼠支原体，还有无胆甾原体、猪鼻支原体、植原体、口腔支原体和精氨酸支原体等等，还有挑单克隆测序时，还发现比对为未鉴定的支原体种类。所以，种类繁多。
图片跟楼主见到的一样。我们还做过很多支原体的细胞粘附实验，其实很多支原体（体型胖的更明显）在10倍镜下就可见

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老师，我最近在培养DF1细胞，把买回的细胞种子复苏后，第一代细胞长势很好。但是传到第三代的时候原来流线梭形的细胞大部分都变成圆形，随着时间的增长同一瓶形态比较好的细胞也变成圆形。细胞的分裂增殖能力差贴壁的细胞不多，即使贴壁也渐渐变成圆形，还有一些呈现不规则的神经元形状。实验室怀疑是支原体污染，我拍了几张照片，请老师看看是不是。谢了

不是，DF1我学生曾经养过，用1640培养基传几代以后就成这个样子，可能是不适应你的培养基（最好用DMEM）或者像某种病毒感染。

不是，DF1我学生曾经养过，用1640培养基传几代以后就成这个样子，可能是不适应你的培养基（最好用DMEM）或者像某种病毒感染。

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我用的培养基是HYCLONE的高糖DMEM，血清也是GBICO的胎牛血清。培养的条件已经够高了，并且第一第二代的培养的细胞状态挺好的，就是第三代开始成这种形态（第二代冻存的复苏也是这样）。感觉不是培养基的问题。至于病毒的感染也不太可能吧，实验室同时培养的细胞都没被感染过啊。 老师遇到这样的情况以后，换用了培养基以后就解决问题了吗？由于急着用DF1细胞，但是却养成这种形态，比较郁闷。请老师再指点一二吧。

DF1其实还是很好养的细胞系。如果你确定不是这些问题。细胞种子的来源就是主要的怀疑对象。我们当时确实是把那批细胞种子扔了，重新复苏很久之前冻存的种子，然后用DMEM稳定下来的。质疑病毒污染是我当时的个人看法，因为我不觉得这是支原体造成的。但我们的基本目的并不是研究细胞污染，所以，扔掉重新来就行了。也没有深究。
如果你没有冻存第一代和第二代种子，可以重新联系更换购买事宜。

您认为是不是细胞系老化的问题呢？