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标题:[求助]谁能帮我看看这是不是肺泡II型上皮细胞

小野花[使用道具]
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发表于 2011-12-29 16:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我一直很想看看养出来的是什么样子呢，自己养不出来干着急。

请教：用什么酶消化细胞，弹性蛋白酶还是胰酶？
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小野花[使用道具]
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发表于 2011-12-29 16:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我今天做了一次，好像染完BCIP /NBT也都脱片了，反正基本上看不到细胞，郁闷，我打算明天把培养24小时的再鉴定一次。
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兔唇[使用道具]
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发表于 2011-12-29 16:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不知道上面两位，做这个细胞做的怎样了？
我正开始做，我打算用胰酶消化。不晓得效果怎样
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小野花[使用道具]
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发表于 2011-12-29 16:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也是用胰酶，效果不是很好　，不过应该不完全是酶的问题。
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发表于 2011-12-29 16:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我培养了2次，细胞还可以，但细胞的污染问题没有解决。
楼上的师兄师姐们谈谈你们的方法。谢谢。
to bamboo：能不能发点BICP/NBT鉴定后的图片？
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小野花[使用道具]
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发表于 2011-12-29 16:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的细胞倒是不污染，我有好几次想往上面传照片，可是总传不上去。而且最近要忙着找工作了，也有好一段时间没有做了　。
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发表于 2011-12-29 16:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
污染的问题已经基本解决，我现在的问题是如何寻求到一种高效、可重复性好的消化方法，以后还要用的。再一个原因，我感觉贴壁效果好像不是很好，我用的自己作的鼠尾胶原。
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发表于 2011-12-29 16:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
小野花：
最近你还在做类试的试验吗？
我用胰酶进行消化，消化效果总是不好，想还用分散酶或是弹性弹白酶，原装太贵，且时间太长，不知道在哪里能买到分装的？
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yysr238[使用道具]
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发表于 2011-12-29 16:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

具体是不是type II细胞，我感觉必须用抗体染色-如sp-c抗体才能知道纯度是多少。
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guagua[使用道具]
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发表于 2011-12-29 16:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

因试验需要，我们用胰酶灌注消化小鼠获取ATII细胞，但效果不是很好。用大鼠相对要好很多，主要原因是小鼠难于操作，灌注不充分，做过的师兄们能不能提些经验和小技巧？谢谢！
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