细胞世界

呵呵，你的疑问很正确哈。
第一，我消化下来的细胞不离心，直接用新鲜的培养基吹打下来细胞悬液，加入到新的培养瓶中。
第二，“二传”就是为了要留下细胞生长状态最好的细胞，所以才要留贴壁早的，把还没有贴壁的细胞扔掉。这是为了筛选出年轻力壮的细胞。必须得扔掉一些不好的。

原代培养的话7-10天是要传代的。
有黑点有可能是污染，也可能不是。既然你的培养液没有浑浊，那应该就不是污染，污染的话培养液很快就会变浑浊的。
你现在应该把细胞传一代了。记得洗一洗细胞，如果细胞数量多的话可以考虑“二传”。我们上次也是这种情况，细胞上有不明黑色物体，最后就是用这个方法搞掉的。

附：黑色物可能是牛血清中的杂质，是你的牛血清质量不够好，要么是国产的，要么是澳大利亚或新西兰那边的吧？

不好意思啊，你这个细胞还真是没有养过啊。
不过我们做其他细胞的时候有用到过，就是对于贴壁不牢，不容易贴壁的细胞，帮助他们贴壁的。你的应该也是？？呵呵。。

小陈小陈 wrote:
我养的是293细胞，细胞代数不是很高，但是细胞的状态很不好，三四天都不怎么长，也不知道是什么原因，而且培养基里似乎漂了好多小的黑点点，请楼主指教！


293细胞生长快，通常倍增时间不到一天 。每3-4 天1：10至1：20稀释加入培养液，在5% CO2条件下培养。

293细胞贴壁是很疏松的，建议你只用培养基进行吹打（吹打不下来的话只用EDTA进行消化）。可不用胰蛋白酶过度消化。这样对细胞生长状态保持好。培养基更换每2-3天一次。

另外，293细胞在室温时不易贴壁的，37℃几日后才重新贴壁。所以控制好温度。

你的小黑点如果确定不是污染的话那就可能就是培养急用血清中自身带入的杂质了，这个很常见的，我们消除的办法就是“二传”。呵呵。你可以试一试的。但前提是你必须把细胞量
先养起来。便于筛选。

293细胞生长快，通常倍增时间不到一天 。
293细胞贴壁是很疏松的，建议你只用培养基进行吹打（吹打不下来的话只用EDTA进行消化）。可不用胰蛋白酶过度消化。这样对细胞生长状态保持好。