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标题:[分享帖]怎样降低MTT法试验过程中的各种影响因素?

fei1226com[使用道具]
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MTT已经摸索了一个多月了,OD值特别低,苦思不得其解,无计可施,求救!!
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小鱼鱼[使用道具]
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回复 #11 fei1226com 的帖子

你种的细胞是多少?OD值低是活细胞少呀!
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园丁##[使用道具]
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做MTT加药前,细胞大概长到什么密度才可以,百分之五十行么
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小鱼鱼[使用道具]
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回复 #13 园丁## 的帖子

看你测加药后多长时间,测24h还可以,更长时间的话可能太密啦!
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盼盼[使用道具]
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做MTT又出现了怪现象。24孔板,接种密度为10000个/毫升。5小时贴壁后换2%血清的培养基同步化(无血清的细胞会死)。24小时后,加药。但是今天准备加MTT时,发现,对照组(没加药)细胞竟然死的差不多了,不像是染菌。估计是不是血清太低,但是为什么其他加药的孔细胞没有死呢。。。求高人指点啊
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做MTT又出现了怪现象。24孔板,接种密度为10000个/毫升。5小时贴壁后换2%血清的培养基同步化(无血清的细胞会死)。24小时后,加药。但是今天准备加MTT时,发现,对照组(没加药)细胞竟然死的差不多了,不像是染菌。估计是不是血清太低,但是为什么其他加药的孔细胞没有死呢。。。求高人指点啊

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请问:1、加药组的血清浓度是多少?
2、药物是生长抑制还是促进作用?
3、每孔种多少毫升细胞?
4、细胞正常情况下增殖如何?
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盼盼[使用道具]
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1 加药组 是提前将药物加到2%血清的培养基中,24孔板,每孔1毫升培养基
2 测试的这种药物 按以前师兄师姐做的结果是,低浓度促进生长,高浓度抑制生长。但我始终做不出来,不知道是不是细胞不同的缘故。
3 加药前,同步化24小时后,对照组细胞长势也不错,加药前细胞密度大概百分之五十
4 接种密度是 10000个/毫升,没孔细胞悬液一毫升。
情况就是这个样子,不知道有没有什么好的建议。。。谢谢了
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阿敏[使用道具]
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做MTT又出现了怪现象。24孔板,接种密度为10000个/毫升。5小时贴壁后换2%血清的培养基同步化(无血清的细胞会死)。24小时后,加药。但是今天准备加MTT时,发现,对照组(没加药)细胞竟然死的差不多了,不像是染菌。估计是不是血清太低,但是为什么其他加药的孔细胞没有死呢。。。求高人指点啊
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我的一个同学做MTT时也出现过细胞死了的情况,有可能换液时,吸就培养基后细胞暴露在空气中时间太长,细胞干了,建议换液时动作快点。这仅仅是个人意见!
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小鱼鱼[使用道具]
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1 加药组 是提前将药物加到2%血清的培养基中,24孔板,每孔1毫升培养基
2 测试的这种药物 按以前师兄师姐做的结果是,低浓度促进生长,高浓度抑制生长。但我始终做不出来,不知道是不是细胞不同的缘故。
3 加药前,同步化24小时后,对照组细胞长势也不错,加药前细胞密度大概百分之五十
4 接种密度是 10000个/毫升,没孔细胞悬液一毫升。
情况就是这个样子,不知道有没有什么好的建议。。。谢谢了
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对照组的死细胞有可能是挤死,有可能是污染。再种一次板,试试种5000个每孔。其它条件不变。
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qqq111[使用道具]
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不错--围观借鉴一下--最近我也是在做这方面的实验--不过我很是怀疑--现在MTT法还是检测细胞增殖最好的方法吗?是否有什么更好的方法呢?
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