液相色谱

这几天在做中药复方，用的是C18 的新柱子（今天是连续第四天用），采取梯度洗脱（流动相：乙腈和水，梯度洗脱是先等度，再梯度，再等度，再梯度），在跑方法学考察时，前三天一直很正常。但今天却出了问题：
梯度阶段，前三天基线漂移幅度不大，且等度阶段时，基线是平的（这种状况应该是正常）。
但今天跑时，梯度阶段与前三天的漂移方向完全相反：前三天向上漂的，今天却向下漂移，该向下漂的，今天却往上飘，且幅度很大，等度阶段时基线漂移。我百思不得其解。（注：排除气泡因素，预柱污染因素，平衡时间因素），
望请各位大虾指点迷津

柱子有没好好冲洗过，你用乙腈做流动相么，你用纯甲醇当流动相好好冲冲，调成你的流动相后基线稳定时间长点，试试

可能的原因：
1、室温不稳。
2、检测池或系统泄露。
3、样品组分保留太长。
4、梯度洗脱过程溶剂体系未达平衡。
5、流动相被污染。

有没有流动相配错了？

1、静电干扰（检查检测器外壳地线）
2、电源电压不稳（稳压电源）
3、氘灯老化（紫外检测器，检测能量判断——更换）
4、光路光珊老化（检测能量——更换）
5、电路板故障（更换）

检测池问题或者
柱子冲洗不够，流动相配比是否正确

逐渐增加甲醇比水的浓度冲洗

　　——基线漂移要考虑以下几个因素：

　　1.灯能量不足，解决办法：换灯

　　2.流通池、管道污染，解决办法：用50%异丙醇冲洗，再用纯的异丙醇冲，最后用超纯水把流动池的异丙醇冲洗掉，冲洗时间自己掌握吧。

　　3.样品脏，解决办法：除去杂质，提纯样品。

　　4.考虑泄漏点

　　5.气泡

　　6.色谱柱老化

　　7.柱温波动

　　8.仪器的稳定性也是一个因素吧，先要确保仪器的稳定。

　　9. 实验室电压是否稳定，色谱柱冲洗不干净。

　　10. 流动相过滤一下，脱气，设备线路单独别和其他频繁启动的设备在一个线路上?

　　11. 如果泵出口的压力正常，可能就不是脱气或柱温的原因，我认为更多的可能是系统为充分平衡或流动相脏

　　12.系统中污染物溢出;

　　13.RID检测器温度不稳定。

重要做好用保护柱吧

换一下流动相，试试走空白是否也这样子。再者就是你的灯可能有问题了。