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标题:[讨论帖]细胞冻存管理

lixi559[使用道具]
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发表于 2012-1-12 10:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们实验室有专门老师管理，有个小本子，冻存与复苏都要登记时间、实验人、细胞种类、存放位置，很少出错的
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dog002[使用道具]
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发表于 2012-1-12 10:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
封口膜在液氮里浸泡后就会脱落，原因不详，可能和低温以及塑料的变性有关，封口最靠谱的还是医用橡皮膏。
冻细胞缓冻 速溶。
没有程序降温盒的话，用个泡沫盒子 带盖子可以密封的。放到-70度冰箱里头，细胞预先降温到4度，最好能在-20度里冻一会（有降温保护的）。
把盒子盖上然后就冻吧，透过缝隙的慢慢的降温，不比程序降温盒差，顺便赞一个楼上用棉花的 非常聪明的方法
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caihong[使用道具]
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发表于 2012-1-12 10:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

想问一下，冻存前有杀支原体的必要吗？听说支原体能在液氮中生存
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发表于 2012-1-12 10:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

冻存前确认细胞形态以及活力，通常建库时都是买来的细胞扩增，然后建库。建好库了才是实验。
实验室的话，尤其是自己分的细胞，原代细胞，建议，在确认你所分离到的细胞是你的目标细胞时就开始建库吧。不然说不定哪天培养箱***了，实验室抽风了，熏甲醛了，培养基染菌了，n多原因可以把你所有工作都毁掉。而冻存细胞是让你重新开工最快的方法。
冻存结束后，取出3只，1只检测无菌，1只复苏，检测活力。1只检测支原体。

顺遍问一句，大家认为染了支原体的细胞还有多大的保存意义？ 有文献说中国貌似30%的细胞都带支原体，我们也刚经历了一次非常惨痛的支原体污染。
大家在实验室工作时，如何确定支原体污染，如何对抗支原体污染呢？
我只知道支原体可以在-80度里很好的被保存下来，液氮？ 没尝试过，不知道。
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baidukk[使用道具]
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发表于 2012-1-12 10:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果是常用切单一的细胞，我们是建立三级库管理的 即原始库，主库和工作库，原始库不经常动的，但主库和工作库需两年后重新建立，以保持细胞的活性。对细胞库可实行双人管理。
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生物迷[使用道具]
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发表于 2012-1-12 10:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

本人也在整理细胞库，下面是我最近一段时间通过查资料整理的一份细胞冻存复苏记录，请各位哥哥姐姐提意见：
其中Location是保存位置，如A-3-6,表示A架第3层第6孔
Remaining指剩余数，这样很容易看出还剩多少管细胞，无需将细胞提出来数
Growth Properties：贴壁、悬浮或半悬浮
Media指该细胞生长培养基
Frozen in指细胞冻存液成分


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2012-1-12 10:42
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greenbee[使用道具]
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发表于 2012-1-12 10:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问一下，液氮气态层温度到底是多少啊？跟液氮里温差很大吗？不是说最好保存在气态层吗？温度可以保证，还不容易管子炸裂。
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ladyhuahua[使用道具]
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发表于 2012-1-12 10:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

建议液氮也要管理，定期检查，及时加入。
条件允许的话，弄个温度报警器，毕竟存放的细胞如果应为液氮不足导致细胞挂掉，损失是无法估量和弥补的。
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zhezhe[使用道具]
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发表于 2012-1-12 10:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我目前了解到的管理方法是细胞冻存都是各自自己操作的，但是在从-20度转到-80度，最终转入液氮罐中都是专门人管理，而且细胞的复苏冻存记录也都是这个人专门管理，全部都是电子版。不过楼上有人提到用手写版，我觉得有些实验室真的很难养成，困难还是很多的，不过最近大家都想设计细胞库管理软件，不过不知道这样透明化会不会不太好？
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flower-201[使用道具]
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发表于 2012-1-12 10:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们这边都是 科室自己买液氮 然后交实验中心维护 这样 科室或者各个老板之间都可以自己买 自己管理自己的 估计最好了
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