细胞世界

冻存前确认细胞形态以及活力，通常建库时都是买来的细胞扩增，然后建库。建好库了才是实验。
实验室的话，尤其是自己分的细胞，原代细胞，建议，在确认你所分离到的细胞是你的目标细胞时就开始建库吧。不然说不定哪天培养箱***了，实验室抽风了，熏甲醛了，培养基染菌了，n多原因可以把你所有工作都毁掉。而冻存细胞是让你重新开工最快的方法。
冻存结束后，取出3只，1只检测无菌，1只复苏，检测活力。1只检测支原体。

顺遍问一句，大家认为染了支原体的细胞还有多大的保存意义？ 有文献说中国貌似30%的细胞都带支原体，我们也刚经历了一次非常惨痛的支原体污染。
大家在实验室工作时，如何确定支原体污染，如何对抗支原体污染呢？
我只知道支原体可以在-80度里很好的被保存下来，液氮？ 没尝试过，不知道。

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好像我看到过罗氏有一种支原净的产品，不知道大家使用过没有，效果如何？

把每个冻存架标上号，每个架子上的冻存盒自下而上依次编号（即使不写明，也要默认自上往上第几盒），在记录本上明确记录各人的冻存架号，每个冻存架上所冻细胞的种类，冻存管数。每次有人复苏细胞，需要登记复苏细胞名称，管数，如此，每次打开液氮罐之前先搞清细胞放在何处，打开后直接取用即可。我们一般这样操作，目前还没出现什么问题。
如果实验室人多，且冻存盒数少，那只好多人分一个冻存架，但务必标明冻存盒归属，这样在一两分钟内取出细胞，不会影响大局。
我们这里冻存细胞存在的问题：即使冻存管口多层封闭，液氮仍有可能会跑进部分冻存管，只要有液氮进入，细胞复苏时即使不炸管，也是有百分之六七十的污染率，这一直是我比较头痛的问题，因此，最近在考虑，如果可以，想买个深低温冰箱（-150度）用于冻存细胞和组织。

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可以用封口膜试试，在放入液氮之前都裹上封口膜，一般就不会再渗入液氮了

看到好多人说用质量好的冻存管，液氮就不会进入了。我们用进口corning的，但还是会进入，使用橡皮膏和保鲜膜也都不管用，请问大家都使用什么牌子的冻存管，内旋还是外旋的，多谢高人指点

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试试封口膜吧

如果暂没有液氮罐，能不能将冻存细胞先存在-80度冰箱呢，对细胞有影响吗？求高手赐教

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三四月不成问题，我们最长放过半年，只要中间没有断电等事故发生就好~~~