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标题:[讨论帖]细胞冻存管理

铜雀[使用道具]
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把每个冻存架标上号,每个架子上的冻存盒自下而上依次编号(即使不写明,也要默认自上往上第几盒),在记录本上明确记录各人的冻存架号,每个冻存架上所冻细胞的种类,冻存管数。每次有人复苏细胞,需要登记复苏细胞名称,管数,如此,每次打开液氮罐之前先搞清细胞放在何处,打开后直接取用即可。我们一般这样操作,目前还没出现什么问题。
如果实验室人多,且冻存盒数少,那只好多人分一个冻存架,但务必标明冻存盒归属,这样在一两分钟内取出细胞,不会影响大局。
我们这里冻存细胞存在的问题:即使冻存管口多层封闭,液氮仍有可能会跑进部分冻存管,只要有液氮进入,细胞复苏时即使不炸管,也是有百分之六七十的污染率,这一直是我比较头痛的问题,因此,最近在考虑,如果可以,想买个深低温冰箱(-150度)用于冻存细胞和组织。
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彼岸花opp[使用道具]
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细胞冻存一般都是程序冻存的吧,先4度30min,再-20度1h,再-80度过夜,最后放进液氮里就行了。我们一直都是这么做的,好像也没什么问题。
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loli[使用道具]
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我们现在的细胞冻存管理也比较乱。主要是放的时候没有孔号,常常是有空位就放进去,然后复苏的时候一个一个的找,也比较麻烦
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穿越时空[使用道具]
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我也提个建议啊:我们实验室的冻存和复苏信息中有一项你们没有提到的,就是在冻存前和刚复苏后给细胞拍照,作为冻存前后的对比,就像现在的纯种犬生下来和死亡前都是拍照建立“身份证”一样,同时冻存完毕一个月后,必须做复苏实验
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vvmmoy[使用道具]
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管理好细胞库不仅需要这样子的登记措施,管理好库文件也相当重要。冻存记录,复苏记录,不仅仅是建立卡片的事情,还有相关的操作人员,操作步骤,操作中的异常情况记录等等。

细胞的来源,种属等信息也是非常重要的,给每支细胞配备唯一的身份代码,录入数据库进行管理。当然,需要一定的计算机数据库管理知识。不过做好了,对将来的细胞使用和申报都带来便利。
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社会主义好[使用道具]
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今天师姐给了我四中皿脂肪细胞,可是发现我没有培养基了,好可悲啊,最可悲的是pbs也不多了,连冻存都没有退路了,只好把培养基一倒,做油红O了。所以冻存前可要准备齐全东西啊,我感觉实验最重要的就在于准备。
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tangxin_80[使用道具]
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四福晋[使用道具]
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封口膜在液氮里浸泡后就会脱落,原因不详,可能和低温以及塑料的变性有关,封口最靠谱的还是医用橡皮膏。
冻细胞缓冻 速溶。
没有程序降温盒的话,用个泡沫盒子 带盖子可以密封的。放到-70度冰箱里头,细胞预先降温到4度,最好能在-20度里冻一会(有降温保护的)。
把盒子盖上然后就冻吧,透过缝隙的慢慢的降温,不比程序降温盒差,顺便赞一个楼上用棉花的 非常聪明的方法

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请问一下,医用橡皮膏封口冻存管的效果怎样?怎么使用呢?会不会影响到冻存管放到程序降温盒里?
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guagua[使用道具]
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学到了很多,但有一个不明白的地方:细胞入库之前怎么样确定有没有支原体呢?有的话怎样去除呢?谢谢
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园丁##[使用道具]
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个人一点经验:

1、依据冻存位置记录

2、如果有条件的话,将保种的细胞和需要经常复苏取用的细胞分开保存

3、parafilm膜封口,以免液氮进入管内

4、在-80度不要太久,8小时以后及早移入液氮罐
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