小中大养细胞已有一段时间了,从好养的恶性肿瘤细胞开始到原代细胞,细胞系相对好养,只要注意无菌一般不会有什么情况,原代细胞一般比较娇贵,取时费时费力,更加要注意无菌,我养细胞都没有加过双抗,一定要相信自己的实验技术,自己准备一切物品,准备充分,培养基开瓶后也不宜放置过久,PH值会发生改变,此外胰酶的污染也不容小觑,现在在培养原代肝细胞,用的是胰酶消化法,同时也在用胶原酶消化作比较分析,肝细胞取出后相继污染了几次,应该是同一种东西污染,发黄,有恶臭,其中有一次加了一点青霉素抑制住了,但是并没有从根本上解决问题,肝脏和肠道离得较近,和肠系膜还有连接,不知道是否为肠道菌群,请各位高手指点。