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标题:[未解决]液相色谱 平衡时柱压一开始猛增到180bar

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
hg30717580[使用道具]
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液相色谱 平衡时柱压一开始猛增到180bar

HPLC 缓冲盐平衡时 基线波动

由于A相为醋酸钠缓冲液 D相为60%乙腈 所以做完样品之后  把A换为水 D换为纯乙腈就用90%水 冲了1个小时 随后变为 60%水 40%水 10%水 纯乙腈  最后封柱子
但是今天做时  先用D相平衡 没问题 但是用A相平衡时柱压一开始猛增到180bar 这我能理解 随后又下降到169bar 然后没几分钟 又开始缓慢上升 估计有4分钟了 上升到175bar 也没有稳定的意思
肿么办
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unknow[使用道具]
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回复 #1 hg30717580 的帖子

做的时候各个管路都要先排气泡,两项之间的过渡要缓慢进行。
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thereyoube[使用道具]
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醋酸钠在乙腈中溶解度很小,因此楼主这样换来换取醋酸钠溶液和乙腈的比例,肯定有醋酸钠在乙腈中析出,从而柱压升高。建议楼主用98:2的水/甲醇冲洗,使盐全部溶剂流出,在换用乙腈冲洗。这样柱压肯定会下来的。
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kflsjjfdl[使用道具]
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流动相平衡过程中,因流动相组分变化而粘度变化,而造成压力波动,是正常现象。平衡一段时间就好了。
另外流动相存在气泡也会造成压力波动,超声一下就好了。

若非上述原因。
管路因长期使用缓冲盐溶液,而逐渐有盐析出,也会造成压力波动。把那些单向阀密封圈之类的卸下了异丙醇超声清洗就可以了。另外,管路也可使用90%水清洗1h再改用异丙醇清洗。
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hg30717580[使用道具]
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换来换取醋酸钠溶液和乙腈的比例?
因为我的流动相是用乙腈
您的意思是做完之后 再换成甲醇? 调甲醇水的比例冲 然后再换回乙腈?
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thereyoube[使用道具]
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你是做完关机吧?如果昨晚关机,哪就可以直接用甲醇水冲洗后再直接用甲醇冲洗,能后关机。换回乙腈,是让你试试盐有没有冲洗干净,没别的意思。
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hongyan417[使用道具]
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因流动相变化,系统在平衡过程中压力出现波动是正常的。
建议:
关机前 ——90H2O+10乙腈(V+V)冲洗后,再用纯甲醇冲洗,
                 最好不用纯乙腈。
开机后——先用90H2O+10乙腈(V+V)冲洗,再过渡到醋酸钠缓冲液、
              60%乙腈流动相体系。
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