色谱爱好者之家

　　【摘要】 目的 建立宁心胶囊定性鉴别方法。方法 采用薄层色谱法,分别以化学对照品、药材为对照,鉴别样品中丹参、黄芪、苦参等主要组成药物。结果 样品薄层色谱分别与化学对照品(丹参酮ⅡA、黄芪甲苷、苦参碱)及对照药材(丹参、黄芪、苦参)薄层色谱在相应位置上显相同颜色斑点。结论 定性鉴别方法重复性、可行性好,为宁心胶囊制定定性质量标准提供了依据。

　　【关键词】  宁心胶囊;薄层色谱法;丹参酮ⅡA;黄芪甲苷;苦参碱

　　宁心胶囊为本院制剂,由丹参、黄芪、苦参等药物组成,具有宁心安神、益气养心、活血通脉功效和抗心律失常作用,对胸痛、心悸也有良好的治疗效果。本试验采用薄层色谱法,对宁心胶囊样品中的主要组成药物丹参、黄芪、苦参等进行定性鉴别,为本品的质量控制提供依据。现将试验结果报道如下。

　　1 仪器与试药

　　PBQ-1型自动铺板器(重庆南岸动力仪器厂),恒温水浴锅(常州国华电器有限公司),紫外透射反射仪(北京六一仪器厂),KQ-500超声波清洗器(上海超声波仪器厂)等。

　　宁心胶囊(本院制剂室自制,批号080613、081025、090301);对照药材丹参、黄芪、苦参(购自江苏南通鑫鑫医药药材有限公司,经本院陈峰生主任中药师鉴定);对照品丹参酮ⅡA(批号110766-200416)、黄芪甲苷(批号781-9002)、苦参碱(批号100078-200414),供含量测定用,购自中国药品生物制品检定所。硅胶G(青岛海洋化工有限公司产品)。所用化学试剂均为分析纯。

　　2 方法与结果

　　2.1 丹参的鉴别

　　取丹参酮ⅡA对照品,加乙酸乙酯制成每1 mL含2 mg的溶液,作为对照品溶液。取本品内容物粉末2 g,加乙醚10 mL,置具塞试管中,超声提取30 min,滤过,滤液挥干,残渣加醋酸乙酯1 mL使溶解,作为供试品溶液。取丹参药材1 g,按上述供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液。按处方量,取除丹参外的其余药味按工艺要求制成缺丹参的样品,按供试品溶液制备方法制备阴性供试品溶液。吸取上述溶液各5 ?L,分别点于以同一羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一部)附录ⅥB]试验[1],以苯-乙酸乙酯(19∶1)为展开剂,展开,取出,晾干, 10%硫酸乙醇液喷雾显色,热风吹干(80 ℃),日光下检视。供试品色谱中,在与对照药材、对照品色谱相应位置上显相同的暗红色斑点。

　　2.2 黄芪的鉴别

　　取黄芪甲苷对照品,加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液,作为对照品溶液。取本品内容物粉末2 g,置索氏提取器中,加甲醇50 mL冷浸1 h,水浴回流2 h;提取液回收甲醇并浓缩至干,残楂加水10 mL微热使溶解;用水饱和的正丁醇萃取3次,合并正丁醇萃取液,用氨试液处理2次,弃除氨液,正丁醇液蒸干,残渣加水3～5 mL使溶解,放冷;通过D101型大孔吸附树脂柱,先以水50 mL洗脱,弃除水液,再用40%乙醇30 mL洗脱,弃除40%乙醇液,继用70%乙醇50 mL洗脱,收集洗脱液,蒸干,用甲醇溶解并转移至2 mL量瓶内,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。取黄芪药材粉末1.5 g,依上述供试品溶液的制备方法制备对照药材溶液。按处方量,取除黄芪外的其余药味,按工艺要求制成缺黄芪的样品,按供试品溶液的制备方法,制备阴性供试品溶液。吸取上述溶液各5 ?L,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一部)附录ⅥB]试验[1],以氯仿-甲醇-水(13∶6∶2)(10 ℃以下放置过夜)为展开剂,展开,取出,晾开。喷雾10%硫酸乙醇液显色,热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材、对照品色谱相应位置上显相同的暗蓝色斑点。

　　2.3 苦参的鉴别

　　取苦参碱对照品适量,加氯仿制成每1 mL含1 mg的溶液,作为对照品溶液。取本品内容物粉末1 g,置具塞锥形瓶中,加氯仿-氨水(25∶0.3)20 mL,超声提取20 min,滤过,水浴蒸干,加氯仿适量溶解,滤过,定容至10 mL,作为供试品溶液。取苦参药材粉末0.5 g,加氯仿25 mL,浓氨试液0.3 mL,放置过夜,滤过,滤夜蒸干,残渣加氯仿0.5 mL使溶解,作为对照药材溶液。按处方量,取除苦参外的其余药味,按工艺要求制成缺苦参的样品,按供试品溶液的制备方法制备阴性供试品溶液。取上述4种溶液各5 ?L,分别点于同一以2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一部)附录ⅥB]试验[1],以苯-丙酮-甲醇(8∶3∶0.5)为展开剂,展开,取出,晾开,喷以碘化铋钾试液,热风吹干。供试品色谱中,在与对照药材、对照品色谱相应位置上显相同的鲜红色斑点,而阴性供试品色谱在此位置上无斑点。

　　注：1,2.对照品;3,4.对照药材;5,6.供试品;7,8.阴性供试品

　　3 讨论

　　苦参是本制剂的主要成分之一,笔者参考文献[2]对苦参进行定性鉴别,同时对方中丹参、黄芪进行了定性鉴别。试验结果显示,制剂中丹参、黄芪、苦参药材的薄层定性鉴别斑点清晰明显,结果重复性好,可作为宁心胶囊制订定性质量标准依据。本品君、臣药指标性成分的含量测定方法与标准有待进一步研究制定。

　　【参考文献】

　　[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.附录31.

　　[2] 钱 梅,徐金荣,周进军.宁心胶囊的质量标准探讨[J].时珍国医国药, 2006,17(5)：782.