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标题:[分享贴]细胞培养减少污染的小细节

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11
 
1.喷酒精后擦一遍无菌台,然后再放东西进去,最好先干净一点的抹布
2.东西确实不能太多,注意摆放位置,这个我觉得很重要。可以避免很大的污染。
3东西放好后,再喷一次酒精,照二十到三十分钟紫外。
4.将要用的溶液放在旁边,有的要热的,要的要冷点的,都准备好
5.洗干净手,喷好酒精手到胳膊以上,点好酒精灯再放东西。
6.每个拿进去的东西都要喷酒精,我习惯先喷手,左手拿东西再喷,再放到台子里。
7.长袖短袖倒无所谓,我一直都短袖,没有污染过,呵呵。
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园丁##[使用道具]
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就是你帶一次性手套,洗兩遍手還是必須的=============================================
真的很奇怪,楼主做细胞试验不戴一次性的无菌手套吗?
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园丁##[使用道具]
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13
 
很有關系。短袖其實是不被允許的。尤其是更要求無菌的實驗================================================
7.长袖短袖倒无所谓,我一直都短袖,没有污染过,呵呵。
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西子[使用道具]
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14
 
洗手?我们都直接带手套喷酒精。。。没事~~
有人穿半截袖的白大褂~~ 我是把长的白大褂挽起来,相当于半截
因为我觉得我们的白大褂没洗比喷了酒精的手还脏~~~

不过实验做了好多没啥污染的
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15
 
我认为与细胞污染有关的因素:
最重要的是环境,包括细胞培养箱。细胞培养最好能有单独的一间屋子,经常清洁。
其次是用的细胞培养相关器具的质量、无菌状况。
穿白大褂还是算了吧,一般都会很脏,有条件穿手术服,或者一次性服装。国外实验室细胞培养几乎不会有特别的衣服,即使有,别人首先是考虑的保护人,而我们却首先考虑的是保护细胞。
手套可以,也应该多注意喷酒精。无菌操作这些最基本的,应该都会,所以我认为这到是其次。
个人意见,大家愉快讨论。
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baidukk[使用道具]
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16
 
不住还是要argue一下,虽然说得的确很有道理。
1,反复的洗手加喷酒精,为什么不带乳胶手套?夏天还好,冬天如何?男生皮糙肉厚还好,女生细皮嫩肉如何?不要说乳胶手套贵,比起反复的仍细胞便宜得多。
2,白大褂真的有那么干净吗?我一般都不穿白大褂,尤其夏天,热是其一,没必要是其二,穿白大褂那是为了防护自己。
3,超净台照紫外是步骤一,吹20分钟是步骤二,步骤二的重要性远大于步骤一。
4,说话对细胞培养是没有任何影响的,只要不影响到你的操作。大家一起边做细胞,边聊天,其乐无穷。
5,我倒认为save是做细胞的一条基本原则。至于细胞生长异常要具体问题具体分析,有些细胞你是仍不起的。

呵呵, 尖锐些,别介意。
实验小心一些是好,但不要因而缩手缩脚,会吓走一批人。

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看到楼主的话我也想这么argue一下
做了这么久细胞,我也有些自己避免污染的经验:
1 不怕花钱,宁可全部用一次性的也不要相信高温高压消毒。
2 不要穿长袖白大褂,胳膊可以洗干净,多喷点酒精,然后为了防止培养细胞用的液体把手弄脏,请戴手套(注意,不是为了防止你污染细胞,而是怕实验药剂伤害你)
3 使用平皿等开盖培养盘培养细胞时,开了盖,手不要在盘上晃来晃去
4 无论是实验时还是实验前用紫外照台子,都请用最大风量吹台子,这样可以防止外界的灰尘进入操作台!
5 拿进操作台的东西最好用酒精喷下或者跟着紫外照下,但是实验前,台子最好越空旷越好,因为吹风会吹得很干净
6 最重要的,不要怕污染,该保存就保存细胞,定期保存细胞一方面节省培养耗材另一方面也是保存实验成果的好方法
7 个人认为,不用点酒精灯。。除非你在实验过程中要用酒精灯考什么东西。我曾经就因为点了酒精灯然后戴橡胶手套的手被点燃。。
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前两条说的是对的。可是好像没有那么苛刻吧?
我们实验室有人带乳胶手套,有人不带,反正操作前都用75%的酒精擦拭手了。
白大褂的问题,夏天穿短袖也没什么啊?
至于您后面说的,都比较赞同。
操作没有出现过污染的飘过~PS:仔细操作的话,想污染是一件比较困难的事。
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小鱼鱼[使用道具]
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LZ有些地方说的过了,我养了这么久的细胞,肯定不是像LZ那些去洗手经常扔细胞,也没有出现大问题。
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whitesheep[使用道具]
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通常我不用紫外灯和酒精灯,但会很认真的洗手
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caihong[使用道具]
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没污染过,不知道啥时候开始全实验室污染了支原体,刚刚白搭了2个月,郁闷中
支原体恐怖,大家小心
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