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标题:[分享贴]细胞培养减少污染的小细节

生物迷[使用道具]
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1,反复的洗手加喷酒精,为什么不带乳胶手套?夏天还好,冬天如何?男生皮糙肉厚还好,女生细皮嫩肉如何?不要说乳胶手套贵,比起反复的仍细胞便宜得多。
2,白大褂真的有那么干净吗?我一般都不穿白大褂,尤其夏天,热是其一,没必要是其二,穿白大褂那是为了防护自己。
3,超净台照紫外是步骤一,吹20分钟是步骤二,步骤二的重要性远大于步骤一。
4,说话对细胞培养是没有任何影响的,只要不影响到你的操作。大家一起边做细胞,边聊天,其乐无穷。
5,我倒认为save是做细胞的一条基本原则。至于细胞生长异常要具体问题具体分析,有些细胞你是仍不起的。

呵呵, 尖锐些,别介意。
实验小心一些是好,但不要因而缩手缩脚,会吓走一批人。

大家可能都听过这样说法,很多国外的实验室,养细胞的人很随便,不用穿白大衣,也不用酒精灯,我没有这样的经历,但是我一个刚刚回国的朋友就是这样做的,细胞几乎没污染过,我们讨论了一下原因,最主要的就是空气质量的问题,我们的环境差,污染的几率就会大增。所以平时的时候,我们实验室就是每周都要用过氧乙酸全面清洁,一旦多个人的细胞出现污染的情况,就必须全面清理消毒培养箱,不要把细胞扔了就算了。还有,我硕士养了2年细胞博士养了3年细胞,从来没有带过手套(除非手受伤了),我们的水池就在细胞间门口,洗完手直接进去,实验室的同学都是这么做的,细胞都长得很好。手套也是污染源之一,我们国内大多数实验室没有经济实力购买外科手术用的几块钱1付的手套,很多几毛钱1付的手套都不是无菌的,有的实验室更是节省,1副手套用坏为止,这样反倒增加了污染机会
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社会主义好[使用道具]
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看了那么多,从我自己的实验室情况出发,防止染菌的关键是不要让手或其他可能带菌的器具在培养皿以及培养瓶的上方通过。其实,即便手上喷了酒精,到底有多少细菌可以被杀死,好像没有确切的统计。我曾经不喷酒精就在超净台里面操作,一点都没有染菌。只要不要把手悬在封口的培养基上,细菌哪里会那么容易被引入培养基里。
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大白菜[使用道具]
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学习了,谢谢提出宝贵建议的楼主们。不过我们实验室都是裸手做细胞的,先洗下手再用酒精棉球擦手,就操作了。
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TNT[使用道具]
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我覺得也許你扔掉一大箱子細胞之后就會注意了。

國產血清我特意和進口血清培養過,實在是不如進口
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说说我们实验吧
戴无粉手套,从来不喷酒精,更不用洗手,也不见污染啊。
实验说笑自如,细胞在超净台里呢,有什么影响啊?
最重要的是细胞室里里外外都要干净,我们紫外都照30分钟以上。
我们的实验经验是,国产的四季青血清比进口的GIBCO便宜货好,而且也比它便宜。
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zhezhe[使用道具]
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我说几点意见吧。
1.戴手套喷酒精还是可以做到的
2.每周给水浴箱换水或者加入铜离子检测剂看水浴箱是否染菌
3.培养箱也是一个重要环节,每周定期用酒精擦拭或者观察壁面是否有异物生长,培养箱底部放置一个TRAY放一些BAXTRE WATER定期更换。
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ffooll[使用道具]
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养细胞不污染的细节还有很多的。源头要控制好,首先要确保培养基和胰酶,pbs的无菌,培养瓶的无菌,还有就是那该死的血清——黑胶虫污染!培养基是自己配置的要小心了,这个黑胶虫还是可能污染细胞的,对血清的质量要求很高,有时候灭火处理都不行。哎!
进细胞室请洗手,换鞋,(不带任何佩饰)然后用酒精对手消毒,换上细胞室衣服,然后在带无菌的一次性橡胶手套,然后在用酒精消毒。带上口罩。任何外部进入细胞室的东西应先下缓冲间内消毒后带入细胞室工作台。
细胞室每个月定期消毒,我们用的是甲酚皂,效果很好,就是味道不是很好闻,现在是我们细胞室专属气味,带着这种气味的人大老远就知道是细胞室出来的。
操作的时候,应注意传代时应吸出废弃液千万不能直接倒掉,很容易污染的。
总之养细胞是很花钱,不花钱是养不出好细胞的。
要用一次性的就得用一次性的,要用进口的就得用进口的,不能省!
大家共同努力,养好阿胞!
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whitesheep[使用道具]
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嘿嘿,夏天只要实验室没人,我做实验的时候基本上都是开空调,打赤膊上阵。因为觉得穿实验服对于减少污染没多大关系,超净台的无菌风是从里向外吹,我身上的灰尘进不去。
我觉得,减少污染最主要的是要知道污染源来自哪里。
一是空气中的,二是我们手上,再者就是放在超净台中的培养瓶或者装tip的盒子,枪等实验要用的物品,更要注意培养液。
空气中的污染源我们有超净台帮忙解决,不同厂家的超净台无菌风吹的方向不同,有从里向外吹的,也有从上往下吹的。这里要注意,如果是后者,那我们在用枪吸取培养基的时候,枪不能竖直的往瓶子里伸。无菌风可能会将枪上的灰尘吹到瓶中,增大污染几率。
手上的污染源,避免手上的细菌落到培养物中的方法就是注意手不要在培养物上方经过,更不能用手去接触瓶口。只要注意这两点,熟练了,手不洗,酒精懒得檫,都不会有危险,嘿嘿。。。不过大家做好按正规步骤,洗手,檫酒精。安全第一!
超净台里最好少放东西,东西越多越容易手忙脚乱,也越容易污染。一般我是习惯于在酒精灯左边放培养基,血清等要加到细胞中的东西。右边放装废液的瓶子。这样可以防止双手交叉。
其他一些细节,比如瓶子开盖后注意将瓶口烧一圈,盖子快速过火。操作尽量靠近酒精灯。实验前拖地,保持地面的湿度,防止灰尘飘起。个人觉得紫外开不开无所谓。
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大家对乳胶手套上的滑石粉是怎么处理的?多喷几次酒精?还是带一次性的塑料手套?
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酒精伤手,戴手套好。
东西全部用一次性就行了,本人做了一年多都没试过污染
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dongdongqiang[使用道具]
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废话,我不戴手套,不穿实验服,不用拖鞋,不开酒精灯,实验室聊天,超净台里一大堆东西这样我也做过,也不污染

但是那是实验的态度吗!你知道万一污染了,是哪儿出事了吗?

作为实验者要把任何污染的可能扼杀在摇篮里,而不是一味迁就自己
而且,还有可能误导了别人

显示你自己怎么强是吧?造成那么多不确定因素,万一细胞有点问题,你怎么排除

我根本就不理解这是什么心态,显示?吹嘘?我只能说,I feel sick about him.
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