小中大外周血干细胞移植时，如何对外周血造血干细胞进行采集?
㈠ 采集方法：
外周血干细胞(PBSC)的采集方法与成分血的单采术类似，即用血细胞分离机分离采集外周血的单个核细胞组分。目前最常用的细胞分离机机型是FewnalCS—3000(或CS—3000Plus)。多采用分离淋巴细胞的程序分离。一般情况下行大静脉穿刺即可，外周静脉穿刺困难(尤其是小儿)时需中心静脉穿刺。
采集成人时的血流速度为50—60m1／min，每次分离4—6循环(约3—4h)，分离血液的总容积9L，依据情况连续或隔日采集。对儿童采集时的血流速度和分离的总容积依年龄和体重而定。
㈡ 采集的时间：
一般情况下，恶性肿瘤患者大剂量化疗+造血生长因子动员PBSC时，外周血白细胞＞1.0x109/L、血小板＞(20- 50)x109/L、CD34+细胞＞1％时开始采集，根据血象的恢复速度连续或隔日采集，至血象达到高峰时止，一般采集1—3次。
健康供者用G-CSF动员时，虽在4-6h即可见白细胞增多，但血中CD34+细胞只有在3天后才持续增加，在用G-CSF 5-6天达峰值，其后即使继续用G-CSF，血中CD34+细胞数量逐渐下降，故采集时间应在动员后5-6天，多数1次即能采够，少数需于次日再采1次。为避免血中白细胞过高可能引起的副作用，在白细胞＞70×l09/L时，应减少G—CSF剂量。
㈢ 采集的质量指标：
目前多数医生主张用CD34+细胞数作为采集PBSC时的质量指标。也有作者认为，用处于DNA合成期的MNC数作为 PBSC的质量指标，它比用CD34+细胞更快捷更稳定。
㈣ 植活所需的细胞数量：
PBSCT植活所需PBSC量远超过BMT所需的骨髓细胞量，根据多数作者的报告，MNC＞(5-8)×108／kg，CFU-GM＞ (20-50) ×104／kg，CD34+细胞＞ (2.0-50) x106／kg，可以作为PBSCT植活所需的参考阈值。
如何进行外周血造血干细胞的动员?
正常情况下，外周血中的干／祖细胞的含量占单个核细胞的 0.01％—0.1％相当于骨髓的1％—10％，动员后外周血MNC中CD34+细胞数及CFU—删数均明显高于骨髓。迄今已发现多聚阴离子化合物(如硫酸葡聚糖)、糖皮质激素、细菌内毒素、抗肿瘤药物、四氢叶酸以及造血生长因子等均能有效地动员骨髓和其它部位的造血干／祖细胞进入外周血。
但由于一些药物本身的局限，目前广泛用于临床动员PBSC的主要是抗肿瘤药物和造血生长因子。
常用的方式有3种：
1) 大剂量化疗；
2) 单用造血生长因子(HGF)；
3) 化疗十造血生长因子。
异体供者单用HGF动员。
肿瘤患者则采用大剂量化疗或大剂量化疗加HGF。
HGF较常用的是G-CSF或GM-CSF，其中G-CSF效果优于GM-CSF，因后者的副作用多于前者。
进行外周血干细胞移植的优点有哪些?
㈠ 造血及免疫功能恢复快，移植的费用／效益之比优于BMT。
不管是自体还是异体PBSCT，移植后的植活时间 (白细胞＞1.0x109/L，中性粒细胞＞0.5x109/L和血小板＞20×109/L) 大都在2周左右，比BMT至少提早1周；如果在移植后加用G-CSF或GM-CSF，则植活时间可以缩短至10天左右。
由于PBSC中含有大量淋巴细胞，为骨髓10倍，故移植快速重建免疫。
由于PBSCT后造血免疫功能恢复较快，移植后的感染等并发症及移植相关死亡率明显降低，抗生素及血制品等支持治疗减少，住院时间缩短，因而其费用及效益优于BMT。
㈡ 采集干细胞安全简便：
采集PBSC可以避免采集骨髓干细胞时的麻醉及由麻醉引起的意外，也可避免采髓穿刺的痛苦。对于异体移植而言，动员供者采集PBSC可能比献髓更易被接受，有可能扩大供者尤其是无关供者的队伍。
对于部分晚期MM和肿瘤患者，由于 骨质破坏和肿瘤浸润等原因不宜或不能采髓时，采集PBSC是其干细胞的唯一来源。
