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标题:[求助]来讨论讨论PC12培养那点事

乌贼老弟[使用道具]
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发表于 2012-2-2 17:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主也是要做AD模型吗？我也是要做此方面的实验，为了验证我样品的活性。但是现在我陷入了一个困惑之中，就是细胞选型的问题。之前查看了一些文献，有写到说分化的PC12细胞才具有神经元细胞的功能和结构特性，但我也阅读到了采用未分化的细胞进行造模的文章。所以觉得迷茫的。另外看了这么多大家的交流，发现未分化和分化的细胞在培养方面还是有不少差别的。希望能与楼主多多交流，因为同处实验的初始阶段。不知道楼主现在进行得怎样了？

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我现在也处于跟你一样的阶段，在想使用分化的还是未分化的，是低分化的还是高分化的，比较彷徨，问了好多人都说不清楚
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ladyhuahua[使用道具]
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发表于 2012-2-2 17:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我现在也处于跟你一样的阶段，在想使用分化的还是未分化的，是低分化的还是高分化的，比较彷徨，问了好多人都说不清楚

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我想两个细胞都养一下。因为中文和外文文献中都有采用未分化和分化的。想问一下你是从哪里获得细胞的？
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fei1226com[使用道具]
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发表于 2012-2-2 17:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问诸位 未分化的pc12 需要PLL 包被么？
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ALALA[使用道具]
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发表于 2012-2-2 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不知道楼主的细胞培养是否已经进入了一切顺利的阶段
关注中
请教一下
诱导PC12 分化的 神经生长因子 是 用的什么
需要买试剂比（很贵的)
可不可以用给人注射的呢？
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ALALA[使用道具]
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发表于 2012-2-2 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不知道楼主的细胞培养是否已经进入了一切顺利的阶段
关注中
请教一下
诱导PC12 分化的 神经生长因子 是 用的什么
需要买试剂比（很贵的)
可不可以用给人注射的呢？
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abc816[使用道具]
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发表于 2012-2-2 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也要开始养pc12了~不知道楼主现在养的咋样了~我忐忑中~~~~
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2012-2-2 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也是刚开始养这个细胞，买的未分化的贴壁是圆形的，但长得慢，老师那还有东村的低分化的细胞，也拿来养了，大部分是梭形。贴壁快，长得快，大家都做MTT吗，对于药物接种时机和浓度，剂量大家有什么建议啊，还有未分化的半悬浮细胞，在加入MTT之后4小时弃去上清液大家是怎么处理啊？希望大家能给解答，多谢啊！
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乌贼老弟[使用道具]
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发表于 2012-2-2 17:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我开始养的是未分化的，长得不好，后来改成低分化的，现在长势很好，隔天就得必须传代。我现在也在做MTT，细胞密度调整在10000个/孔，细胞调整密度接种后，如果是早晨铺板的晚上就可以处理，如果是下午铺板的，次日早晨就可以处理了，我先饥饿细胞然后加药，结束后做MTT。半悬浮细胞没做过没什么经验，但据说不太好做，得需要离心吧？知道的分享一下哦
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2012-2-2 17:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你说的早晨铺板晚上就可以处理了是说 到晚上换液和加药 还是直接加MTT? 我是要加药，不确定接种后要多长时间再换液加药，我看有的文献是24小时，有些是48小时，那你说的早晨铺板晚上处理是指12个小时左右吗？我还没开始做，现在有些浓度时间都拿不准，希望多指教，还有你说的饥饿细胞然后加药，结束后做MTT是指什么意思？
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2012-2-2 17:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还有，看你之前的帖子是用胰酶消化传代的，我刚开始传代，未分化第一次是直接吹打的，很难吹下来，好不容易吹下来了，这两天开长得比较慢，而且贴壁也差，我想是不是我吹的太多导致的？你现在还是用胰酶消化吗？浓度选多少，还有需要拍打吗？
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