小中大关于划痕我最近也在尝试,参考了国外的一些书,自己弄了定量模型,不知道到时候发文章的时候外国认不认。
其实划痕很大一个问题就是前后拍照的位置不固定,给药前后的视野固定式一个问题。后来经过指点,发现在板后面标记是个好方法,试验几次后用很小的注射器针头,沿直尺划三条平行线。然后待细胞长满后,划痕同样用直尺比对着与原来板后的先垂直做划痕,一般做三道。这样就会存在内外交叉的9个交点。然后每次拍照的时候用4倍物镜下拍照,取9个交点处。这样最后的图像通过处理可以把两张图重叠,以板后的小针划痕的黑影为基准线。这样就可以得出具体出现迁移的面积。
最后定量就是沿着划痕的方向取义个定长的矩形所框定的里面的迁移面积,这样可以排除不平行的问题,而且这个平均面积也可以等同于迁移的平均距离。有张作好的图,为摸索实验的,做的不漂亮,后面好点,先给大家参考下。
具体图像处理是先用photo shop 将图像合成,再用IPP6.或是DT2000等处理并计算面积。
请问可否提供IPP具体分析步骤?谢谢