样品前处理

各位老师帮帮忙，小弟是新手
EP药典上苯丁酸钠杂质c的检测方法是做气相顶空。先用二氯甲烷萃取，蒸干后，再加硅烷化溶液进行硅烷化，具体方法如下：
Silylation solution. To 2 mL of N,O-bis(trimethylsilyl)tri-
fluoroacetamide R add 0.04 mL of chlorotrimethylsilane R
and mix.
Test solution.Dissolve50.0mgofthesubstancetobeexamined
in 3 mL of water R and add 0.5 mL of hydrochloric acid R.
Extract with 2 quantities, each of 5 mL, of methylenechlorideR.
Evaporate the combined methylene chloride extracts to dryness
in a vial with a screw cap and add 0.5 mL of the silylation
solution.Sealthevialandheatat70±5°Cfor20min.

其中
杂质c：4-cyclohexylbutanoic acid  
硅烷化溶液配制方法是:N,O-双（三甲基硅烷基）三氟乙酰胺（BSTFA，CAS: 25561-30-2）里加入0.04ml三甲基氯硅烷(TMCS, CAS: 75-77-4)后混匀。
硅烷试剂不好保存，市面上有小包装卖，但规格一般为1ml BSTFA+ TMCS 99:1 。我们问题是衍生化试剂BSTFA＋TMCS的用量和比例是怎么确定的？我不按药典上的方法改用1ml BSTFA+ TMCS 99:1行不行？

药典是国家定的最大限量的的最小标准。改是可以改但是你要保证有对比性。在做之前最好按药典做一遍，你才会没疑问。

我们都是用市面上的两种混合在一起，比例99：1

请问EP药典里是多少N,O-双（三甲基硅烷基）三氟乙酰胺（BSTFA，CAS: 25561-30-2）里加入0.04ml三甲基氯硅烷(TMCS, CAS: 75-77-4)后混匀？

从楼主的资料看是2ml中加入0.04ml，相当于50:1。
在衍生化的时候理论上都会保证衍生化试剂使用量大于需要量，以保证样品全部衍生化。

看到英文里面有2ml。BP是50:1，市售一般是99:1，效果应当差不多。

换算下来是100:2,与99:1之间相差不大，我认为没有影响的。
BSTFA+1%TMCS是作为衍生化试剂来用的，具体用量方法上有提到，如果没有，从科研的角度出发的话，给出一个目标化合物浓度，就是逐步增加眼生化试剂用量直至衍生物量不增加为止，一般是这样来做的。
说明一下，TMCS在这个衍生化试剂中的作用是起到催化剂的作用，加速衍生化反应的进程，如果仅仅是BSTFA，衍生化过程则需要过夜才行。

TMCS如果起衍生化作用，那其实是100:2或是99:1影响不会太大。
另外，我们用BSTFA衍生化TBBP-A的时候没有加催化剂，1个小时也能衍生化完成。

衍生化反应的时间，具体的也与温度、溶剂的极性也有关系的，一般温度高、极性溶剂可以加速衍生化反应的进程，但是关键因素还是TMCS了，这个是理论上的东西，我没有验证过，谢谢分享。

谢谢各位老师的回帖，我心里有底了。本来是想按药典上的方法试试，但就是因为BSTFA太贵了，且不好保存，所以才考虑用小包装试试。