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标题:[求助]求助流式细胞仪测定细胞ROS的方法?

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还有,这个DCFH-DA测ROS的 是测的超氧离子还是过氧化物?
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想问下群友,我最近也在用荧光酶标仪测细胞内ROS的含量,我想问下你用来裂解的细胞的专用裂解液可以用做western提取蛋白的裂解液替代吗?我问了一下试剂公司,他们说要测细胞内荧光就用那种非变性的裂解液,上海生工有一种一步法动物细胞活性蛋白提取试剂盒,不知道能不能用来做这个,而且它这个裂解需要震荡5-10分钟,不知道这么长时间裂解对荧光有没有影响,还请你帮我指点迷津啊,谢谢了!
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jijuancindy[使用道具]
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回复 #7 西子 的帖子

“对于刺激时间较短(通常为2小时以内)的细胞,先用DCFH-DA处理,后用活性氧阳性对照或自己感兴趣的药物刺激细胞。对于细胞刺激时间较长(通常为6小时以上)的细胞,先用活性氧阳性对照或自己感兴趣的药物刺激细胞,后用DCFH-DA处理。我处理时间是24h,所以先处理,后用DCFH-DA。

请问您上面所说的,因为处理时间是24h,所以先处理后用DCFH-DA,那活性氧阳性对照也是跟自己的样品处理一样的时间吗?例如您的24h。。。
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