小中大我综合了好多的PI染色protocol，形成了我认为简单可行的流程，如下：
流程如下：
1． 收集细胞，数量需1－2×10E6个（悬浮细胞直接吹起即可，对于贴壁细胞用胰酶消化时，最好用DMEM+胰酶消化,且消化过程中不要去移动瓶子，防止消化所形成的细胞团影响后面的染色及分析），离心，11,000rpm，5min。
2． 用1ml 冰冷的PBS重悬后，离心：11,000rpm，5min。
3． 用200μl冰冷的PBS重悬后，用加样器混匀后，缓慢的加入含有4ml冰冷的70％乙醇的10ml离心管中，边加边摇匀。－20℃，过夜。（或者置4℃，1h后进行下一步）
4． 1,500rpm，10min，小心弃上清后，用1ml冰冷的PBS重悬，1,500rpm，5min。小心弃上清。
5． 加入含有40μg/ml 的PI，100μg/ml的RNase的PBS溶液500μl，37℃，培养30－1h。
混匀。
溶液配方：PBS 910μl
PI 80μl
RNase 10μl
共1ml
6．过滤，供流式检测。
PS1：这个Protocal里我想离心的转速是否太高，据我们一位老师说，离心力太高了，会把细胞弄死的或者说状态不好？我没有求证过。心里面却是认为这是可以的。你可以再找一下。
我用的PI：鼎国 500μg/ml
PS2：请有经验的人对此Protocal提点问题或建议，谢谢
