小中大这个比例和浓度的流动相应该是没有问题的,年前我也用氨基柱流动相恰好也是这个,做了近一个月时间没有出现缓冲盐析出的问题,不过氨基柱特别是新氨基柱不好平衡是真的,我们新买的柱子第一次用也是很久(4-5小时)也不平衡,用过几次以后,流动相每天仍需要平衡1-2小时。建议楼主先换上同比例的乙腈水0.6ml/min平衡一个小时左右,然后重新配流动相,过滤,超声,也是先低流速平衡再调至1ml/min 多平衡一会儿试试。
补充一点,我们也出现过基线下飘的情况,不过看漂移的程度,如果检测波长接近末端吸收基线是不容易完全走平的,在可接受范围内就哦了,这个也和检测器灯的情况有关的;还有柱压也是,小范围的波动也可以接受,波动的太厉害就要考虑脱气是否完全,泵内是否有气泡了。