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标题:[求助]SH-SY5Y细胞培养问题

bananapeople[使用道具]
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一、人神经母细胞瘤细胞系SH-SY-5Y细胞常规培养与含有 100IU/ml青霉素及100μg/ml链霉素的高糖DMEM培养液中,如果长得不好可以增加胎牛血清浓度如15-20%
二、用0.125%的胰蛋白酶消化后,吸弃一部分培养液后,直接传代,不要加edta,不要离心,这个细胞贴壁不好,所以很好消化,而且低浓度胰酶也不影响传代。
三、这还是3年前做的,已经记不清了,但是我感觉当时养的还是很顺利。主要是血清浓度,和消化传代都是自己摸索的。
遵照上述方法,如果养的不好,本人不负有任何责任。
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3648755[使用道具]
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谢谢楼上,我们的条件基本一样,只是FBS浓度稍低,我们会试下您介绍的方法,谢谢!
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baidukk[使用道具]
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这个细胞贴壁性是不好,塑料瓶能好点,最好用进口的胎牛血清,应该能好很多
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summerxx[使用道具]
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感觉SH-SY的5Y挺好样的,我的细胞长的很好,大约隔天就要传代
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吴才子[使用道具]
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一、人神经母细胞瘤细胞系SH-SY-5Y细胞常规培养与含有 100IU/ml青霉素及100μg/ml链霉素的高糖DMEM培养液中,如果长得不好可以增加胎牛血清浓度如15-20%
二、用0.125%的胰蛋白酶消化后,吸弃一部分培养液后,直接传代,不要加edta,不要离心,这个细胞贴壁不好,所以很好消化,而且低浓度胰酶也不影响传代。
三、这还是3年前做的,已经记不清了,但是我感觉当时养的还是很顺利。主要是血清浓度,和消化传代都是自己摸索的。
遵照上述方法,如果养的不好,本人不负有任何责任。

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我现在养的SY5Y细胞,大概4天传一次代,遇到了很麻烦的问题,做MTT时,4小时后,吸掉MTT加DMSO时,总是会把细胞吸掉,离心后也不太好,大家遇到过类似的问题吗,有什么解决的方法啊,谢谢。。
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831226[使用道具]
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大家做过这个细胞的分化吗?有经验的交流下,我前几天做了分化,3 4天左右就死掉了,原因可能是接种密度太小,然后又提高密度,已经诱导3、 4天了 ,还是增殖明显,没有见很长的树突。该怎么诱导呢?
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dragonkilly[使用道具]
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5y是神经细胞怎么可能是圆的?
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大尾巴[使用道具]
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我也正在培养SH-SY5Y细胞,而且已经养了有大半年了,不过细胞生长一直很缓慢,即使以1:2的比例传代后也要大概一周时间才能长好,很是着急。我一直是用1640培养基+15%FBS,加双抗和谷氨酰胺培养的,想求助楼上是如何培养的,使细胞长的那么快?恳请赐教~~~
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pengke1983[使用道具]
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我的SH-SY5Y每次复苏都大量死亡,不能贴壁,求各位高手赐教怎么培养?
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pengke1983[使用道具]
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感觉SH-SY的5Y挺好养的,我的细胞长的很好,大约隔天就要传代

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