液相色谱

大家在做正相色谱分析试验过程中有没有因为试剂，发现重复性太差。
原因？解决方案？
请有经验的色友高谈论阔。

有遇到过，一直得不到很好的相同R值。后来发现溶剂的酸性导致了此现象。解决方案是：加长平衡时间。其实这种情况可以考虑更换方法了。

色谱级的正己烷和异丙醇，打开直接用，重复性很好。

今天看到一篇帖子cuturl('http://bbs.antpedia.com/thread-25587-1-1.html')

在正相色谱分离模式中，水是一种溶剂强度非常高的溶剂，即便流动相中有少量的存在就能对保留时间产生强烈的影响，特别是在硅胶或氧化铝为固定相而使用的流动相非极性或疏水性很强的情况下尤其是这样。因为烷烃类溶剂天然含水量极低，基于无水烷烃的流动相，需要很长时间才能和环境中水分达成平衡。所以，正相色谱中几天的时间观察到保留时间的漂移是司空见惯的。可能正是存在这个令人头疼的问题，成为了当今正相色谱没有反相色谱那么普及常用的主要原因。

使用溶剂强度ε0大于0.35的流动相，保留时间漂移的问题不大，用极性基团键合的正相固定相时，ε0值还可以更小些。此外，还有一个非常有效的改善正相色谱保留时间重现性的方法：使用和水“半饱和”的正相流动相。

“半饱和”流动相配置方法：将无水的非极性流动相分成两半；其中一半中加入一定量水，并混匀搅拌约一小时，静止分层后，将多余的水相全部除去；将两部分重新混合在一起就配成了“半饱和”流动相。

使用“半饱和”流动相，使色谱柱平衡时间大大加快，极大改善了保留时间的重现性；另外流动相中的一定量水分，首先和固定相表面的活性最大位点作用，结果使表面不均一性减少，非特异性吸附影响减弱，可获得更对称的峰形。

有，比如说试剂纯度，容量瓶的清洁度。
好多时候为了省钱买回来试剂必须先纯化。

这个问题是很容易就遇到的：
1、有可能是因为你的样品在水中的稳定性不好。
2、你用的液相是不是在线混合的？如果是，那有可能是你的在线混合不好，我们之前试过这样子，但将两种溶剂混合在一起再超声之后就好了。
3、你可以适当增加有机相的比例看一下还是不是这样的。

正相色谱你用的是什么类型的色谱柱？

溶剂含水问题不能控制吗？

为啥一定要用水，能否换用别的溶剂？正相色谱怕水，有水可能会导致重复性差的

买高纯无水试剂？