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标题:[求助]人骨关节炎软骨细胞的培养

flower-201[使用道具]
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11

发表于 2012-2-15 13:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我用的是0。4%II型胶原酶，加DMEM一起等倍稀释成0。2的，然后放在培养箱过夜消化。效果很好的，基本上第三天贴壁，早的第二天就贴了。
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ha111[使用道具]
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发表于 2012-2-15 13:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #11 flower-201 的帖子

楼上的你做的是人的软骨吗，是否是健康的？
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北风那个吹[使用道具]
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发表于 2012-2-15 13:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我做的也是人OA软骨细胞，长的挺好的。我先用2.5%的胰酶+EDTA消化半小时，再用0.2%的II型胶原酶分阶段消化。刚开始2小时一次收集消化出来的细胞很少，后来软骨快变小后消化两小时收集的挺多的。第二天约50%贴壁，3-4天几乎全贴壁。开始我用含10%FBS-DMEM三周长了70%，后来换为20%FBS-DMEM十天左右就长满70%，后越长越慢。这时就可以消化了，并且可以1传4传代，长的很好。
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