小中大我的细胞养了3个月了,但一直没有养好,经过数十次的失败,总结出一点自己的体会,与大家分享。
1、做细胞培养,任何事情都要身体力行,绝不能让别人代劳,因为细胞培养受太多的不确定因素的影响。
2、规范操作,这是做细胞培养的基本功,没有规范的实验操作,很难养好细胞。
3、以上两点,我想大多数同道都能做到,但有一点是我们常常忽略的,那就是对一切都要持怀疑的态度。当细胞培养失败时,任何因素都值得怀疑,尤其看似正常的东西,只有如此,才可能尽快找出失败的原因。
以下是我在养细胞时的两次失败总结:
1、刚开始养细胞时,培养液的PH值总是通过酚红指示剂的颜色和PH试纸来粗略判断,但细胞总养不好,后来我用PH计测正红色的培养液,发现PH值高达8.4,此事告诉我,培养液的酸碱度绝不能仅仅通过颜色或PH试纸来简单判断,最好用标准PH计测,配好的培养液,一周后若颜色无明显变化,可用试纸简单测一下,若有较明显变化,最好再次用PH计测,以免影响细胞生长。
2、最近,我养的细胞总是碎片很多,并且不出一周,细胞就大都死亡了,经多次调整,但始终未找出原因,肉眼观察已培养3天的细胞培养液,仍透亮清澈,但今天我用高倍视镜观察,发现细胞是被污染致死。此事再次告诉我,做细胞培养,当失败时,你可以怀疑任何因素,除你想到的可能失误外,尤其还要考虑那些看似正常的因素,往往原因就在其中。
以上两点是我的一点体会,写出来供同行交流学习,谢谢!!