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标题:[求助]关于神经细胞培养

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发表于 2012-2-15 16:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这是长得很密的


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发表于 2012-2-15 16:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
兄弟，太感谢你了，我也在发愁。
我发现你养的细胞和我的很像，都是很难和成纤维细胞分辨，我现在每次取材的时候都发现脑膜很难完全剥除，总是留有点脑内血管的星星点点，不知会不会导致成纤维细胞生长。
我每次取材和传代都用差速贴壁法一次，但是发现新瓶里面的细胞和差速贴壁瓶的细胞很相像，不知是不是***作的问题。我用的是0.25%的胰酶+EDTA消化15分钟，差速贴壁30分钟
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发表于 2012-2-15 16:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
为了确定星形胶质细胞和成纤维细胞的区别，我专门取了剥除的脑膜组织培养了一瓶，图片如下：
培养2天的


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发表于 2012-2-15 16:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
培养5天的


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发表于 2012-2-15 16:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我怎么觉得和兄弟你的细胞很类似的，其实我有很多个瓶子都有这些漩涡状生长的细胞，甚至很多都占了主要地位，我都很怀疑是不是都是成纤维细胞了，不知有没什么好办法能去除成纤维细胞？
另外你说的“铺路石”样会不会就是我第一张图上C区域的细胞排列样子呢，还是像下图的细胞样子呢（也是我这普遍出现的细胞，胞体比较大，呈多边形，不能确定是否成纤维细胞还是AST）？


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发表于 2012-2-15 16:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我做的是小鼠，每次做原代是都很小心，脑膜应该剥除得比较干净（除了将成片的脑膜剥下来，还专门用镊子将脑组织撕成细块，寻找并剥除残余的脑膜），同时还做了差速贴壁，所以这样的话，我觉得成纤维应该被大量去除。
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 小中大
我怎么觉得和兄弟你的细胞很类似的，其实我有很多个瓶子都有这些漩涡状生长的细胞，甚至很多都占了主要地位，我都很怀疑是不是都是成纤维细胞了，不知有没什么好办法能去除成纤维细胞？
另外你说的“铺路石”样会不会就是我第一张图上C区域的细胞排列样子呢，还是像下图的细胞样子呢（也是我这普遍出现的细胞，胞体比较大，呈多边形，不能确定是否成纤维细胞还是AST）？

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“铺路石”我也不知道究竟是什么的，只是在很多培养星胶的资料上都这样描写培养状态下的星胶，所以一直都很困惑。
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发表于 2012-2-15 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这是我做的AC 第二代（还未做鉴定） 贴壁很牢 用0.25胰酶-0.02EDTA很难消化下来 最后用2型胶原酶消化下来传的 各位都是怎么消化的呢？


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发表于 2012-2-15 16:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用BIOVISION的试剂盒，这个进口的，效果比较好~~我用的就是~
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 小中大
我怎么觉得和兄弟你的细胞很类似的，其实我有很多个瓶子都有这些漩涡状生长的细胞，甚至很多都占了主要地位，我都很怀疑是不是都是成纤维细胞了，不知有没什么好办法能去除成纤维细胞？
另外你说的“铺路石”样会不会就是我第一张图上C区域的细胞排列样子呢，还是像下图的细胞样子呢（也是我这普遍出现的细胞，胞体比较大，呈多边形，不能确定是否成纤维细胞还是AST）？

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我觉得这个好像是星胶
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