小中大
因为3T3-L1加入诱导剂以后，收缩得很厉害，比较脆弱，很容易就飘起来。所以加诱导剂的时候，手法要特别轻，最好用枪头加，不要用移液管，因为移液管家的时候很难控制流速，力度大。用枪头加诱导剂的时候，一定要贴壁加，让液体慢慢留下，这样对细胞的冲击小。我正在做诱导分化，感觉细胞飘起来一小部分的话，还是能用，没有什么大的影响，如果范围比较大的话最好重新诱导。
你的诱导剂的浓度与一般人用的浓度不太一样。IBMX大家一般都是用0.5mmol/L，胰岛素一般都是1-10ug/ml，dex有用0.25，1，10umol/L的。另外，不知道你买的胰岛素是水溶性的吗？因为一般的胰岛素是不溶于水的，但是在酸性环境中溶于水，所以配液时需要加一点稀盐酸使胰岛素溶解。其他两种诱导剂你的配液方法没有问题。
镜下观察细胞接触抑制什么形态？这有什么可说的吗，不就是长满了吗，互相接触在一起了，如果你的细胞出现叠丛现象了，那么就是接触抑制过度了，那细胞就更容易飘起来了。这就需要你自己把握好时机，因为要使接触抑制时间不够的话，细胞没有退出生长周期，诱导剂就不会起作用；如果接触抑制过度的话，细胞很容易就飘起来。你自己需要自己摸索。
祝实验顺利
