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标题:[讨论帖]起来分享大家在细胞培养中的“独门秘技”

987789[使用道具]
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因为我是在学习,带我做的学长批我,我就接受了,原来还有风向这个区别在里面啊!那我要再次请教一下我们实验室的大“牛”了,而且要确认一下风向。

近来又犯了一些错误,大家看看是不是哈!
1 细胞传代: 一开始的是原代,传一次,标签是一代,不是二代。因为我想一传代不就是第二代了吗!后来说是这样分的,原代细胞,一代,二代~~~~~
2 老是紧张,手总是抖,一定不要怕!吸培养基的滴管不能碰到其他的东西,以免污染整瓶培养基。拿滴管的时候要四指握柄,大拇指摁胶头,这样会稳点。
3 传代时,加了胰酶后放到一边,进行下一瓶的换液,以提高实验的速度。因为有时候老师等那瓶消化,确实浪费时间,如果多的话,时间也不够用。
4 在熟悉操作步骤后,加快速度!

我只是做了细胞的复苏, 换液, 传代,其他的还没有接触过啊!后面的体验回继续总结的!

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兄弟,我也是刚开始接触细胞实验,从4月9号到今天已经一个月了,一开始每小时都要被师姐骂,心里很是不服,当然自己确实错了不少,现在渐渐的一天只被师姐骂一次啦,要不断进步,以后两天才被骂一次,再一个礼拜才被骂一次哈哈。共同进步。
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最近又接触了一些养细胞以外的实验,比如制作切片,爬片,染色等,过程太慢了!还没有什么经验可以总结。

由于较长时间没有养细胞,后来发现培养箱里的有几瓶已经污染了,,拿出来甩了!对于那些传代多的细胞不能再传了,也用不到了,有不舍得扔,还要节省经费,就那样放着也不好!还是当初实验的时候没有计划好,造成了现在的情况啊!
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可是有的细胞如果养得太稀,会因为细胞之间缺少联系而很快就死掉啊!不知道LZ想过没有

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LZ说的那个方法,细胞不会太稀,我做单克隆的时候是10cm dish 里中二三十个细胞,要是怕细胞因为太稀死掉,可以用同种细胞的大量培养的培养基与新鲜培养基1:1去培养。
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一博士告诉我铺24孔板的方法:先按自己需要加好细胞及培养基后用移液器垂直于板孔中央轻轻吹打两次即可,我试了一下效果不错,比十字交叉摇的效果好。

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反正十字交叉摇,不适合我,我摇了之后细胞全聚集到中间来了...
下午试一下这个方法。
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我养的是滑膜细胞,贴壁,梭形。我发现养了段时间有时候皿底会有白色点点,会不会是细胞团块啊,觉得也不是很像污染,细胞状态和原来差不多。另外,想问问是不是状态好的细胞一定不会有空泡和黑点点,我的细胞常会出现黑点点、空泡。会不会有些细胞本来就是有黑点和空泡???谢谢
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消化前,你用不用DPBS洗
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