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在细胞培养中,除了常规应该注意的问题,每个人都会有自己的“独门秘技”,不妨拿出来一起分享,一起讨论,一起提高。也不限于细胞培养,如果在其他实验中有什么“独门秘技”,也请拿出来分享。
我先来抛砖引玉,有的是老师教的经验,有些是网上学来的别人的经验,也有自己的心得,说得不对的,请大家指正:
1、不要等一瓶细胞培养液完全用完,才启用第二瓶。最好第一瓶还剩一点时,就启用第二瓶,如果第二瓶培养液有问题(如被污染),不致于毁掉你所有的细胞。
2、不要指望让自己的所有细胞“步调一致”,即在准备用来做实验的几瓶细胞较一致的同时,使另几瓶细胞量有多有少,以确保细胞不致于同时长过了死掉,或同时因瓶内细胞太少没长起来。
3、有时候经验上的“多少瓶细胞长多满能接种多少块培养板”,比细胞计算板来得更可靠,毕竟用细胞计算板计算其实夹杂了太多主观因素。
4、有时遇上长假,又不想把细胞都冻起来(毕竟重新复苏的细胞状态还是要差点),可以把吹打过细胞的吸管的头在新培养瓶的培养液中沾一下,继续培养,一般能保持一个星期以上没有问题。各人可以根据自己的细胞摸索一下。
5、关于胰酶消化贴壁细胞,其活力主要在于浓度。所以我消化细胞时喜欢在倒掉旧培养液后将培养瓶立起来几十秒,吸去流下的培养液,吸极少量胰酶润一润,再吸走,再吸入一点点胰酶消化,轻轻摆动培养瓶,让胰酶浸润到所有的细胞。我试过多种细胞,一般这样消化个一两分钟,就可以吹打了。一般1ml胰酶能消化2~3瓶细胞没问题,而且效果强于倒掉旧培养液后直接滴入1ml胰酶消化10分钟(毕竟倒掉旧培养液后瓶内不止残留1ml旧培养液,再入1ml胰酶,其浓度只有原来的一半)。这是我看到别人的经验后试了下,改了下,不全是我自己的。
欢迎大家参与讨论,有说得好的,请版主不要忘了举举小手手。