细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [讨论帖]做树突状细胞的同行们请进

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 107  8/11 |‹‹‹234567891011››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[讨论帖]做树突状细胞的同行们请进

nn255[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76746
精华 0
积分 652
帖子 1024
信誉分 100
可用分 5877
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-9
状态 离线
71

发表于 2012-2-24 13:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
从人脐血单核细胞诱导DC，所需的GM-CSF及IL-4的合适浓度是多少？他们的U及ng的换算关系是怎样的？恳切希望不吝指教。
顶部
nn255[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76746
精华 0
积分 652
帖子 1024
信誉分 100
可用分 5877
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-9
状态 离线
72

发表于 2012-2-24 13:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
GM-CSF及IL-4的合适浓度,很多文献都不一样,具体该用多少我也不能把握.换算应该参考说明书.
我发现:培养几天后的细胞,取出悬浮细胞到另外一个干净的培养瓶后,仍可以见较多紧密贴壁的巨噬细胞.怎样才能更好控制单个核细胞不向巨噬细胞等其它细胞分化呢
顶部
utt0989[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 78340
精华 1
积分 660
帖子 975
信誉分 102
可用分 5663
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-28
状态 离线
73

发表于 2012-2-24 13:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

大家好，文献上的剂量是gm1000u/ml,il-4 500u/ml，不过现在的细胞因子说明书是活性，单位可以自己换算。
我前一段时间做DC用的细胞因子的剂量是上面的，但不知怎的，DC越来越少，我自己做，师姐做也一样，后来，另一个硕士做也一样，不知是出在淋巴细胞分层液还是细胞因子的问题上。最近我有做了一次，（因为淋巴细胞分层液暂时买不到其他厂家的）将细胞因子的量用的稍微多点，半量换液时，加总量的3/4，感觉这次的DC数量还可以。
TO忧愁风雨
换算是按说明书上做的，如IL-4
活性单位是5×106units/mg，你可以据此换算的，从mg算指u。
不知说的是否明白，也不知是否对，请大家指正。
顶部
milkdog[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79280
精华 0
积分 500
帖子 719
信誉分 100
可用分 4366
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-9
状态 离线
74

发表于 2012-2-24 13:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我看到有的文献上说，GM-CSF的作用是诱导单核细胞向DC 及巨噬细胞转化，而IL-4的作用是阻止单核细胞向巨噬细胞转化，使更多的单核细胞向DC转化。这一点你可能早就清楚了。
顶部
milkdog[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79280
精华 0
积分 500
帖子 719
信誉分 100
可用分 4366
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-9
状态 离线
75

发表于 2012-2-24 13:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还有，告诉大家，淋巴细胞分层液在没开封之前要放在室温下，开封后放在4度冰箱中。以前没注意到，影响了分离效果，当时估计是淋巴细胞分层液的问题，但不知道是与此有关！
顶部
fqswdzd[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77226
精华 1
积分 295
帖子 285
信誉分 102
可用分 2181
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
76

发表于 2012-2-24 13:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
，能说说你培养DC的方法吗？用什么方法照的像1，2，3张?
顶部
fqswdzd[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77226
精华 1
积分 295
帖子 285
信誉分 102
可用分 2181
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
77

发表于 2012-2-24 13:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你好，你是在什么时间分离的DC，用什么方法检测的?抗体是什么？
顶部
eric930[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79368
精华 0
积分 722
帖子 1061
信誉分 101
可用分 6148
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
78

发表于 2012-2-24 13:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

大家看看我的问题，哪位站友知道的望赐教！
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=3962675&sty=1&tpg=1&age=0')
顶部
fsdd817[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 78590
精华 1
积分 590
帖子 795
信誉分 102
可用分 4841
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-30
状态 离线
79

发表于 2012-2-24 13:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
想问一下半量换液是不是比较浪费DC
顶部
gogo[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77052
精华 0
积分 821
帖子 1341
信誉分 100
可用分 7487
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-12
状态 离线
80

发表于 2012-2-24 13:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
分离单个核细胞时，淋巴分离液的温度一定要把握好，否则很影响分离效果
顶部
 107  8/11 |‹‹‹234567891011››