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你用的血清可能不行!
你很可能没有做过血清的质量检测(支持极低密度细胞生长的能力).
我也用过Gibco的新生牛血清,结果是长出来的融合细胞很少,四季青的新生牛血清我没用过(不会比Gibco的新生牛血清好吧?),hyclone的产品我是坚决不用的(以前同事用的试用装很不满意).
现在我用的是四季青的胎牛血清,得到的杂交瘤的数量如上贴(其实有时会更多)
另外,加完PEG后用基础培养基稀释时,基础培养基要一滴一滴地加(3秒一滴),这一点很重要,否则细胞会涨破!不知楼主注意了没有?
还有的是,细胞融合后的生长环境对形成的杂交瘤数量也有巨大的影响.我的杂交瘤在液体培养基中长的很快很好(经常有些杂交瘤在5/6天时就可做检测了),但同时做的融合接种在甲基纤维素半固体培养基中的杂交瘤就是长不好,数量也少的多,仅有液体培养基中的四分1左右(接种体积密度相同的条件下)