[求助]裸鼠DC树突状细胞培养求鉴定 - 经验共享

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标题:[求助]裸鼠DC树突状细胞培养求鉴定

dog002[使用道具]
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发表于 2012-2-27 13:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

裸鼠只是T细胞缺陷，不影响DC分化。

不过，为什么用裸鼠？没有任何意义呀！用裸鼠的与用正常的没有区别。

yapuyapu[使用道具]
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发表于 2012-2-27 13:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

裸鼠只是T细胞缺陷，不影响DC分化。

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不过，为什么用裸鼠？没有任何意义呀！用裸鼠的与用正常的没有区别。
原来的方案是想看荷瘤和没荷瘤的PBMC里的DC1和DC2的比例，因为是人源的肿瘤，所以只能用裸鼠。但后来觉得PBMC太少了点，就先用BMC来搞搞了。

yapuyapu[使用道具]
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发表于 2012-2-27 13:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

另外，再请教一下
细胞因子订哪个公司的比较好，R&D的怎么样？
工作浓度GM-CSF、IL-4 各50ng/ml够了吗？
我看见论坛上有的战友讨论到贴壁时间的问题，在这次预实验中，我发现如果仅仅放几个小时似乎根本不够，起码要要1天细胞才能粘在皿上面，几个小时轻轻吸出来的悬液除了淋巴细胞外也把我要的细胞都吸出来了，因为这些悬液再培养两三天也有很多细胞能贴壁。

pencil菲[使用道具]
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发表于 2012-2-27 13:36 资料个人空间短消息加为好友

小中大

骨髓诱导DC一般贴壁48小时再去除淋巴细胞。
如果你要研究荷瘤与不荷瘤的DC有什么不同，应该研究体内成熟的DC，而不应该再重新诱导，否则意义就不大。

hold住[使用道具]
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发表于 2012-2-27 13:36 资料个人空间短消息加为好友

小中大

想请教一下，做DC诱导分化这个实验订细胞因子的话，是订含BSA的那种还是不含BSA的那种。
BSA应该是对细胞因子有点保护作用吧，如果是订含BSA那种是不是溶解是也要用含BSA的PBS。
R&D的细胞因子是要求用Serological Proteins的馏分V BSA（目录#81-068）来重新配制蛋白溶液，有没有必要，还是随便找点BSA过滤一下就可以了?

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