细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]mcf-7培养

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 21  2/3 ‹‹123››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]mcf-7培养

ROSE李[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76171
精华 0
积分 466
帖子 611
信誉分 100
可用分 3866
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
11

发表于 2012-3-6 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我刚买的MCF-7，正在养。感觉细胞生长很慢，10天才能长满，中间还要进行换液。我传代时还从没有将他吹打成单细胞悬液，不管吹多长时间。生长起来时也是一团一团的。非常不均匀。我用的是高糖DMEM+10%的胎牛血清。我想用它做MTT，这细胞长的这么慢我怎么做啊。
顶部
qqq111[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73201
精华 0
积分 830
帖子 1238
信誉分 101
可用分 7086
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
12

发表于 2012-3-6 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
提出一个问题：
就是你们mcf-7传代的时候一定要注意，
一般而言，底25cm2，容积100ml的细胞培养瓶，
当细胞长满80%左右传代的时候，
这个时候加入0.25%的胰酶（我用的是国产博光的，100ml，58元）
加入600ul。消化30s即可！
就是不要消化过了，如果过了，对细胞影响很大！！！
因为消化时间短，并且还需要加入胰岛素，
所以我建议：提前准备好含血清和胰岛素的培养基。
对了，我一般用DMEM，
希望对大家有帮助。
顶部
ROSE李[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76171
精华 0
积分 466
帖子 611
信誉分 100
可用分 3866
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
13

发表于 2012-3-6 15:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

MCF-7一定要加胰岛素吗？我是从协和细胞所买来的，就是用DMEM+10%FBS，没有提到胰岛素，而且刚买来时他们是刚复苏的，才2-3天就长的很满了。
顶部
xue258[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75643
精华 0
积分 746
帖子 1171
信誉分 100
可用分 6696
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-26
状态 离线
14

发表于 2012-3-6 15:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我以前养就没有加胰岛素啊 挺好的
没有什么特殊的
顶部
whitesheep[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 78856
精华 0
积分 825
帖子 1330
信誉分 100
可用分 7476
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-4
状态 离线
15

发表于 2012-3-6 15:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问下各位养过乳腺癌细胞MCF-7的同道们，我查阅的文献都说用10％的小牛血清就可以了，怎么我养的用10％的胎牛加胰岛素一星期时间了都还没长满还没传代？到底MCF-7是好养呢还是肿瘤细胞里面的例外？请指教！非常感谢！

——————————————————————————————————————————

楼主，跟我遇到了一样的问题啊，长得的确很慢，好郁闷，又不敢消化，怕一消化就死了。
但是，我开始传第一代长得还挺快的，不知道为什么第二次传就出这问题了
顶部
ero11[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75131
精华 0
积分 684
帖子 1028
信誉分 100
可用分 5953
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
16

发表于 2012-3-6 15:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个细胞我也在养，不一定非加胰岛素，我用胎牛血清，10%的时候不怎么长的样子，我加到20%，就长起来了，状态很好，后来减到15%，还是很好，预计过几天减到10%看看，大概两三天传代，我是1传2，因为这样密度大，长得也快点。个人意见，仅供参考。
顶部
铜雀[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76992
精华 0
积分 344
帖子 365
信誉分 101
可用分 2611
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-11
状态 离线
17

发表于 2012-3-6 15:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这个细胞很好养的，普通武汉三利的血清就行了
顶部
大尾巴[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76447
精华 0
积分 232
帖子 182
信誉分 101
可用分 1626
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
18

发表于 2012-3-6 15:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我用的1640培养基加10％FBS，复苏后一直没贴壁，是我不应该用1640吗？还是必须用DMEM？
顶部
remenb[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75236
精华 0
积分 631
帖子 941
信誉分 100
可用分 5531
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
19

发表于 2012-3-6 15:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我用的15％FBS1640培养基，mcf-7刚复苏时细胞呈纤维状，养着养着就变成了上皮状，有人说养老了，有人说是正常现象，不知大家有什么意见？
顶部
BOSS2011[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74568
精华 0
积分 427
帖子 534
信誉分 100
可用分 3476
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态 离线
20

发表于 2012-3-6 15:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我最近也在养MCF－7，不知道怎么回事，总觉得细胞看起来没有立体感，扁扁的，而且上面看起来很不光滑，有很多的麻麻点一样的东西，我用的是DMEM+10%胎牛血清（PAA），一般1：3传代，不到两天就长满了，看起来，好像没有什么污染。今天没有拍照，所以没法传图，请各位给分析一下，非常感谢。
顶部
 21  2/3 ‹‹123››