细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]流式细胞仪 间接免疫荧光

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 25  3/3 ‹‹123
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]流式细胞仪 间接免疫荧光

join[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72960
精华 0
积分 627
帖子 873
信誉分 100
可用分 5266
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态 离线
21

发表于 2012-3-10 09:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
去年11月我用流式细胞仪做了MSC表面的抗原鉴定，结果很理想，不需要用多聚甲醛来固定了，因抗原位于细胞表面，而不是在胞内
顶部
nn255[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76746
精华 0
积分 652
帖子 1024
信誉分 100
可用分 5877
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-9
状态 离线
22

发表于 2012-3-10 09:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
只要是染胞内就必须固定，通透，增加细胞膜的通透性，否则抗体如何进入细胞内，固定可用4%多聚甲醛，通透可用皂素；当然有的试剂盒会配备
顶部
nn255[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76746
精华 0
积分 652
帖子 1024
信誉分 100
可用分 5877
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-9
状态 离线
23

发表于 2012-3-10 09:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我比较喜欢的两本流式书籍：
贾永蕊 《流式细胞术》 这本术讲应用讲得比较清楚，具体到怎么操作。

杜立颍、 冯仁青《流式细胞术》这本书讲理论讲得多点，也蛮具体的。
顶部
Ao7[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76545
精华 1
积分 647
帖子 790
信誉分 102
可用分 4976
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-7
状态 离线
24

发表于 2012-3-10 09:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
小弟刚开始接触流式，拟做小鼠脾脏细胞流式检测表面抗原分子，请教各位大侠，在处理细胞时用冷的PBS洗完两遍后孵育抗体半小时，再用PBS洗了就可以上机了吗？需不需要用多聚甲醛来固定？

——————————————————————————————————————

如果你是当天做流式的话 不用固定

如果第二天做的话 需要固定 且标记后的细胞要避光保存 偶一般还放在4度冰箱里
顶部
ffooll[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73418
精华 0
积分 437
帖子 574
信誉分 100
可用分 3666
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-22
状态 离线
25

发表于 2012-3-10 09:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
学习了。

在下也有个问题请教各位高手，我现在正在做流式，是做肝脏组织内的淋巴细胞含量，可是实在不顺利，做了好几例，细胞没有办法圈门，分群不明显，实验室的老师建议先用淋巴细胞分离液，但是具体步骤不知道啊。再摸索还不知道的多长时间。请大家帮忙，有谁做过类似的，给点建议吧，先谢谢了。
顶部
 25  3/3 ‹‹123