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标题:[求助]EDTA怎么溶不了？急问！

mimili_901[使用道具]
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发表于 2012-3-10 10:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个东东是比较难容，多晃动几下耐心点就好了。还有加热也是不错的选择，
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woshituzhu[使用道具]
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发表于 2012-3-10 10:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

加NaOH调pH就可以了，上次我也是这样的
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ladyhuahua[使用道具]
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发表于 2012-3-10 10:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是这样的吗　
当定容１００毫升后，PH值变化了　EDTA就不会再析出了吗　
再说在PH８的时侯加入胰酶　会不会变性
菜问题　　刚准备做　没实践经验　还望指教啊
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junjie05[使用道具]
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发表于 2012-3-10 10:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的方法是这样的，将称好的EDTA溶到定量的PBS液中，可适当加热助溶。然后（冷却后）加入胰酶，过滤，保存。希望能对你有用，也希望和大家交流！
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xueyouzhang[使用道具]
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发表于 2012-3-10 10:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我10月5日刚配置了200ml的胰酶+EDTA消化液，胰酶浓度：0.05%，EDTA浓度：0.02%
方法如下，肯定没问题，相信“大灵通”，（按100ml计算）
1、取胰酶0.05g,EDTA0.02g,加入烧杯（最好不用EDTA2Na或EDTA4Na,因为用1乘PBS已经是等渗，再加离子就不是等渗，原则是这样，我没试过EDTA2Na或EDTA4Na）
2、取1乘PBS（即0.01M)100ml，调PH为7.6-8.0,最好不要过8.0,，否则就太碱了），倒入烧杯。
3、放磁力搅拌器搅拌30分钟。一定会溶。
EDTA的确不好溶，没有磁力搅拌器的话，就只好辛苦您了。
溶解过程中千万不可加热，胰酶会被灭活的呀！
要不你先不加胰酶，就可以加热，把EDTA先溶喽，然后再加胰酶也可以。不过好象麻烦一点，没必要。
虽然有的教科书说可以不加EDTA，但我觉得不好，消化的很慢，半拉咔叽的，建议您还是用EDTA。
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发表于 2012-3-10 10:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

胰酶应该是0.25g呀，呵呵，不好意思。
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8964357[使用道具]
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发表于 2012-3-10 10:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
在溶解试剂前应了解试剂的物理特性，下面是EDTA的溶解方法，希望对你有帮助：
在80ML水中加入18.61gEDTA-NA.2H2O,磁力搅拌器搅拌，用NAOH调节溶液的PH值至8.0（约需20gNAOH颗粒），此时方能溶解,定溶至100ml,然后稀释至你所需浓度。
———————————————————————————————————

急急!!你的EDTA量怎么那么多，我的是EDTA2Na，应该怎么配制呢?
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fqswdzd[使用道具]
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发表于 2012-3-10 10:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

EDTA一般都可用其二钠盐代替的，大多数应用研究上没什么区别的。一定要用非钠盐时，可用NaOH调节pH溶解，但最终形成的还是钠盐。
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misswu61[使用道具]
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发表于 2012-3-10 10:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室配胰酶的方法：
1、用PBS做基础液，先溶EDTA（不用钠盐），加入酚红后可根据颜色来估计　PH值，很方便。加NaOH颗粒，PH值调到7.6至7.8，在磁力搅拌器上一会儿　就溶了
2、在1的溶液中加入胰酶，调PH做到7.6，定溶过滤就ok了
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bananapeople[使用道具]
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发表于 2012-3-10 10:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们一般不加EDTA，用生理盐水（PBS同样）溶解胰酶，水浴37度，大概半小时，稍微加点1N NaOH，然后过滤除菌就可以。
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