小中大你好！我是做内皮细胞的免疫细胞化学。已经做了4次，但总是出现脱片现象和阳性结果过深及假阳性结果。我做了细胞涂片，且载玻片是用铬钒明胶处理的。试剂盒是ABC试剂盒，我的染色步骤是
1）用丙酮固定10分钟，干燥放4度冰箱；
2）PBS洗5分钟*3次
3）3％甲醇—过氧化氢封闭内源性过氧化物酶
4）PBS洗5分钟*3次
5）封闭血清（马血清）30分钟
6）滴加PBS稀释的一抗37度一小时（多克隆抗体）
7）PBS洗5分钟*3次
8）滴加生物素标记的二抗37度30分钟
9）PBS洗5分钟*3次
10）滴加ABC试剂37度30分钟
11）PBS洗5分钟*3次
12）DAB显色10～15分钟
13）自来水冲洗
14）复染
15）脱水
16）透明
17）封片
请多指教 ！还想问的是做细胞爬片的时候，多聚赖氨酸怎样灭菌，是涂上多赖后高压载玻片呢还是把多赖做完灭菌处理好再涂上呢。
