细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [讨论帖]免疫细胞或组织化学染色的相关问题

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 288  7/29 |‹‹‹567891011121314›››|
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[讨论帖]免疫细胞或组织化学染色的相关问题

chuntian1983[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76393
精华 0
积分 421
帖子 522
信誉分 100
可用分 3423
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-4
状态 离线
61

发表于 2012-3-13 12:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

主任你好，我做培养细胞组化染色，一抗可不可以用PBS稀释？DAB显色后怎样使胞核复染？急，急
顶部
chuntian1983[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76393
精华 0
积分 421
帖子 522
信誉分 100
可用分 3423
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-4
状态 离线
62

发表于 2012-3-13 12:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问主任：我做细胞爬片用－20 100％丙酮固定5分钟，细胞全变形了，可是书上说要30分钟！！！怎么会是这样？指教指教吧
顶部
中国特色[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74504
精华 0
积分 223
帖子 185
信誉分 100
可用分 1671
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-11
状态 离线
63

发表于 2012-3-13 12:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
求教：最近做细胞 爬片的免疫荧光总遇见很怪的现象：细胞爬片是用冷丙酮固定30分钟，固定后片子上能见有细胞。但细胞片染完色后在镜下竟然找不到细胞了，真是叫我欲哭无泪。（片子没有擦反，因为用树脂粘在载玻片上后镜下也仍可见细胞）怀疑会不会是固定时的问题，因为为了方便，丙酮是放在4度冰箱里保存的，这样会不会对其有影响？或在反复冲洗中会不会把细胞给冲掉了（不过窃以为这种可能性应是很小）。望主任指点迷津，先谢了 ^_^
顶部
园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
64

发表于 2012-3-13 12:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #63 中国特色 的帖子

我还不太清楚丙酮固定细胞是否会影响他们的贴壁能力。

但是应该注意如下：
1。一定要用PLL包被波片；
2。组化反复冲洗时一定要注意手法，PBS要从侧壁滑下，而不是直接加到细胞上。
顶部
园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
65

发表于 2012-3-13 12:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
主任你好，我做培养细胞组化染色，一抗可不可以用PBS稀释？DAB显色后怎样使胞核复染？急，急

——————————————————————

可以，但是前面的非特异封闭一定要作好。

试试用多聚固定！
顶部
greenbee[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79370
精华 0
积分 710
帖子 1119
信誉分 100
可用分 6368
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
66

发表于 2012-3-13 12:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的问题太菜了： 什么是细胞爬片，怎么做？ 有什么地方介绍这个吗？谢谢了!
顶部
园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
67

发表于 2012-3-13 12:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 greenbee 于 2012-3-13 12:37 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我的问题太菜了： 什么是细胞爬片，怎么做？ 有什么地方介绍这个吗？谢谢了!

把细胞种在波片上，以便于观察！
顶部
star#room[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76306
精华 0
积分 421
帖子 501
信誉分 100
可用分 3361
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-3
状态 离线
68

发表于 2012-3-13 12:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
求教：最近做细胞 爬片的免疫荧光总遇见很怪的现象：细胞爬片是用冷丙酮固定30分钟，固定后片子上能见有细胞。但细胞片染完色后在镜下竟然找不到细胞了，真是叫我欲哭无泪。（片子没有擦反，因为用树脂粘在载玻片上后镜下也仍可见细胞）怀疑会不会是固定时的问题，因为为了方便，丙酮是放在4度冰箱里保存的，这样会不会对其有影响？或在反复冲洗中会不会把细胞给冲掉了（不过窃以为这种可能性应是很小）。望主任指点迷津，先谢了 ^_^

——————————————————————————————————————————

没用过丙酮，可是用4％的多聚甲醛室温固定20分钟感觉就很好的，又不费事，不妨试一试。
顶部
园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
69

发表于 2012-3-13 12:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #68 star#room 的帖子

我们这里一般都是4％的多聚甲醛室温固定！
顶部
woshituzhu[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75774
精华 1
积分 384
帖子 443
信誉分 102
可用分 3001
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-27
状态 离线
70

发表于 2012-3-13 12:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
问一句，4％的多聚甲醛使用冷的还是室温的即可？需要像丙酮一样用冷的吗？（俄没有用过）还望赐教。^_^
顶部
 288  7/29 |‹‹‹567891011121314›››|