细胞世界

我曾经用即用型的工作液，用1％的多聚甲醛于4度的冰箱过夜固定过的标本做出过结果，现在换了浓缩液，就没有结果了。工作液的一抗是IgG1，另外是不是说明书上说适合丙酮固定，就不能用多聚甲醛固定。

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为什么要用浓缩液？

当初用的工作液是国产的1毫升，做了20个人份，只有两个有结果，我对抗体的质量没有信心，大家都说一抗一定要买好的，我就换了进口的浓缩型的抗体。

我的实验步骤：请大家指点！
1.3％的过氧化氢灭活内源性酶，室温下作用30分钟，蒸馏水洗3次
2.滴加正常山羊血清封闭液，室温作用30分钟，不洗。
3.滴加一抗（系小鼠抗人），4度冰箱过夜，时间在18小时以上，PBS洗涤3次，每次5分钟
4.滴加生物素化的山羊抗小鼠IgG，37度的恒温箱30分钟，PBS洗涤3次，每次5分钟
5.滴加试剂SABC,37度的恒温箱30分钟，PBS洗涤4次，每次5分钟
6.DAB显色：使用DAB显色试剂盒，取1毫升的蒸馏水，加试剂盒中的A,B,C试剂各一滴，混匀后加至切片，放置于37度的恒温箱。
始终未见显色。

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你作的是细胞的染色，第一步可以省略。
可以室温过夜试试！
ABC是用什么稀释的？

另外注意结果的判断，完整的象线一样的细胞膜结构是不多见的，而大多数是一些散布的小点点。

有没有人做c-fos蛋白的组织化学染色，偶想问几个问题！

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很常见，很常规。