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标题:[求助]用Lipofectamine™ 2000 转染细胞时...

zsxan1990[使用道具]
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大家怎么理解这句话:Lipofectamine™ 2000说明书上的:
4)incubate the cells at 37°C in a CO2 incubator for 24-48 hours until they are ready to assay for transgene expression. It is not necessary to remove the complexes or change the medium; however, growth medium may be replaced after 4-6 hours without loss of transfection activity.
是不是可以在24-48小时中换培养液

转染后6小时或更久(根据细胞状态而定,一般1 /4~1/5细胞形态改变既可),可以更换完全培养基。再24~48h可以更换含筛选抗生素的完全培养基,这个时间也依赖于细胞的状态(部分细胞开始有生长、伸展的迹象时)。此外,加抗生素时建议不要换液,直接加到培养液中既可,因此时细胞较脆弱,尽量减少损伤)
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woshituzhu[使用道具]
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转染的时候培养液里不加血清,并且转染前用PBS或hank's清洗细胞两遍。尽量的去除血清。血清对转染效率有抑制作用。转染过后最好换液,换成完全培养基。而且转染时培养基内不能有抗生素。脂质体对细胞有一定的毒性的,换掉它比较好。
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hot_hot_hot[使用道具]
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看了上面的讨论 作为转染新手的我 非常想知道另外一个问题 就是根据说明书,转染之前需要更换培养基进行刺激,那么更换的培养基中是否是完全培养基还是物抗无血清的培养基呢?

非常感谢
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