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标题:[求助]MTT实验未加DMSO前变黑色原因

one[使用道具]
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发表于 2012-3-18 11:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我做过不下20次，没有出现过类似情况。但我认为不能用“污染”来解释，因为污染了细胞改变是要有一个过程的，在短短3－4小时内就将细胞“污染”成您描述的那种严重程度，似乎不太可能。我想大概和你的MTT有关，你可以换MTT重新做试一下。
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mimili_901[使用道具]
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发表于 2012-3-18 11:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

细胞数太多了。
即使MTT不在超静台里加，4h细胞状态也不会有如此大的影响。我们带的学生实验MTT都是在外面加的，也出结果。
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c86v[使用道具]
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发表于 2012-3-18 11:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

细胞太多了，你可以试试不同细胞浓度的MTT检测，我做过细菌和细胞相互作用，老是发黑，可能是细菌也可以还原四唑蓝，相应降低浓度就好多了
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DDD[使用道具]
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发表于 2012-3-18 11:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
存在不是细胞数过多原因引起的可能。我最近做MTT也碰到类似的情况。整板中只有一两个孔加MTT后2-3分钟就变黑了。加MTT前显微镜下观察细胞数没有发现个别孔细胞数过多的情况。
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vivian4123[使用道具]
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发表于 2012-3-18 11:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一般测出的OD值是多少比较合适的？ 有人说是要在0.2-0.8范围内是成线性关系，也有人说是在1.5到2多比较好，我也不是很明白，为什么差异会这么大，大家的结果都是什么样子的，哪个好些？
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wu11998866[使用道具]
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发表于 2012-3-18 11:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

加MTT前确定没有污染，那就是细胞数太多了，测出的A大概要1点几了吧？
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gemei0115[使用道具]
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发表于 2012-3-18 11:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也遇到过这种情况，感觉是污染了。
你培养的细胞没有异常的状况吗？
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langlang[使用道具]
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发表于 2012-3-18 11:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1.不会是细胞数太多的缘故
2.如果是细菌污染，加入MTT后只是污染孔颜色很黄很浑浊，不会变黑，加入DMSO后颜色很深。
3.可能是细胞（如黑色素瘤细胞，若状态不好或药物刺激后可变黑）和MTT本身的问题。
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TNT[使用道具]
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发表于 2012-3-18 11:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
污染的可能性非常大，建议换新板从新作一次
我也碰到过
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jkobn[使用道具]
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发表于 2012-3-18 11:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉得MTT的重复率太低了，至于变黑我认为应该是污染了。对了，我想问问MTT值一般在什么范围比较可靠啊，和细胞有关吗，我做的是肠道上皮细胞。
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