小中大结 果：
所有试验的杂交瘤细胞成功地适应了从添加血清和无血清的培养基到直接在CD杂交瘤培养基中生长。与添加血清的IMDM培养基相比，培养在CD杂交瘤培养基中的杂交瘤AE-1具有相似的活性细胞密度峰值，但是具有较高的IgG 水平峰值（图1）。对于杂交瘤细胞P1F6，在CD杂交瘤培养基中的生长和MAb 的产量比在杂交瘤－SFM中效果好（图2）。
图1 杂交瘤细胞AE-1的生长状况和IgG的产量 来自IMDM+10% FBS静止悬浮培养的细胞适应5代，生长在162-cm²的培养瓶中，5天内不更换培养基。Panel A 生长状况 Panel B 单克隆抗体产量。培养基：CD杂交瘤培养基（■）IMDM+10% FBS（□）杂交瘤－SFM()和PFHM Ⅱ(）。
图2 杂交瘤细胞P1F6的生长状况和IgG的产量 来自杂交瘤-SFM搅动悬浮培养的细胞适应3代，生长在125ml的摇瓶中（35ml体积），5天内不更换培养基。培养基：CD杂交瘤培养基（■）和杂交瘤－SFM()。
杂交瘤细胞也被成功地培养在CD 杂交瘤培养基生物反应器中(图3)。此外，生物反应器控制溶解氧和PH值的能力导致比摇瓶对照的更好的生长和更高的产量。图3C显示葡萄糖和谷氨酰胺在生物反应器培养时的利用，表明接种4天后两种成分都变得有限。尽管有必要进一步营养消耗的研究，但是葡萄糖和谷氨酰胺的利用曲线表明，批次添加策略可能进一步促进生长和提高抗体产量。
图3 TP6-25.3杂交瘤细胞在生物反应器中培养的生长状况和IgG的产量 以前适应了CD杂交瘤培养基的细胞以1×10活细胞/ml接种到生物反应器（●）或者对照摇瓶（）中。检测5天细胞生长（Panel A）和单克隆抗体产量（Panel B）。Panel C 生物反应器培养中检测活细胞的百分比（●）、谷氨酰胺存留量（） )和葡萄糖存留量（■）。
讨 论：
细胞易于适应CD 杂交瘤细胞培养基（传代5次以内）并且在多种培养基体系中相对于无血清和无蛋白培养基可得到相似或更好的培养效果。在15L的搅拌罐反应器中成功放大表明这种培养基具有大规模生物生产系统的应用潜力。
已有几种类型的培养基配方可用于杂交瘤细胞培养，包括需添加血清的IMDM，无血清的杂交瘤培养基（包含2种蛋白和一些动物来源的成分），无蛋白质（PFHM II）的培养基（但含有动物来源的成分）和限定化学成分的CD杂交瘤培养基（不含蛋白质或动物来源的成分）。提高细胞培养效果和单克隆抗体的产量，需要更精密的配方以适应不同的要求。限定化学成分的无蛋白培养基简化了单克隆抗体的回收和纯化，同时由于没有动物来源的成分而避免了一些涉及到法规的麻烦。
参考文献
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