[分享帖]肝星状细胞实验步骤 - 经验共享

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标题:[分享帖]肝星状细胞实验步骤

乌贼老弟[使用道具]
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发表于 2012-3-20 12:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 windy+++ 于 2012-3-20 12:26 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

果然如此，消化液是用solutionII配制的。

请问选择I型有其他的文献支持吗？因为我看在大鼠用的几乎都是IV型。

我是自己用collagenaseI和IV 做了平行比较后选择了I的。

windy+++[使用道具]
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发表于 2012-3-20 12:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我建议你在终止的时候用冷的DMEM就够了。因为血清是有粘度的，会让细胞聚成一团。这样可以得到更多的单细胞悬液。

乌贼老弟[使用道具]
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发表于 2012-3-20 12:27 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 windy+++ 于 2012-3-20 12:26 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我建议你在终止的时候用冷的DMEM就够了。因为血清是有粘度的，会让细胞聚成一团。这样可以得到更多的单细胞悬液。

请问普通DMEM和加了血清的DMEM 细胞得率有差异吗？我是说能够提高得率吗？因为我自己还没有比较过，不清楚。谢谢

谢谢建议，下次我有时间会2个方法比较一下的。

windy+++[使用道具]
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发表于 2012-3-20 12:27 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有文献支持，说在梯度离心之前用含有DNaseI的DMEM洗涤一下沉淀。
这样可以使单个细胞游离出来。

乌贼老弟[使用道具]
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发表于 2012-3-20 12:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 windy+++ 于 2012-3-20 12:27 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

有文献支持，说在梯度离心之前用含有DNaseI的DMEM洗涤一下沉淀。
这样可以使单个细胞游离出来。

但是含有DNase的DMEM洗的意义在于用DNase洗掉让细胞们凝聚的genome吧？

qqq111[使用道具]
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