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标题:[求助]JC-1分析结果求助

+小生怕怕+[使用道具]
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回复 #10 66+77 的帖子

谢谢你的不吝赐教。
我的mean值是分象限的。在象限里相互比较有意义么?
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+小生怕怕+[使用道具]
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下面这张是正常组的数据图。


查看积分策略说明
附件
2012-3-20 12:46
20731145.jpeg (47.96 KB)
 
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hulu呼噜[使用道具]
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参见我的一个回帖

cuturl('http://cell.dxy.cn/bbs/topic/17240753')

应将log scale转换为 arithmetic scale,分别得到红、绿荧光的arithmetic mean (AM),然后计算比值Ratio,Ratio=AM红/AM绿。线粒体膜电位受损时,Ratio值降低。
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不要分象限。分象限比较没有意义,因为象限是根据细胞的阴阳性区分的,你的细胞根本就没有阴阳性之分,象限也就没有意义了。或者说,你划的十字线对于你的这种染色结果来说根本就是错误的。
所以,如果你的图要放到文献中,需要去掉十字线。
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参见我的一个回帖

cuturl('http://cell.dxy.cn/bbs/topic/17240753')

应将log scale转换为 arithmetic scale,分别得到红、绿荧光的arithmetic mean (AM),然后计算比值Ratio,Ratio=AM红/AM绿。线粒体膜电位受损时,Ratio值降低。

————————————————————————————————————————

WinMDI 2.9。这个软件,我已经下载安装了,但是全是英文。我还没摸清楚如何使用。
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+小生怕怕+[使用道具]
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不要分象限。分象限比较没有意义,因为象限是根据细胞的阴阳性区分的,你的细胞根本就没有阴阳性之分,象限也就没有意义了。或者说,你划的十字线对于你的这种染色结果来说根本就是错误的。
所以,如果你的图要放到文献中,需要去掉十字线。

————————————————————————————————

原来如此,这个图误导了我。谢谢!
这图是做流式的老师给我的,关于这个结果,我还是要重复再做的。
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hulu呼噜[使用道具]
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WinMDI 2.9。这个软件,我已经下载安装了,但是全是英文。我还没摸清楚如何使用。

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以下是你的结果(density plot)。你的细胞群的位置有点问题,在下图的坐标中,control细胞群的位置宜摆在近象限中点心处,这样受试组的结果会比较好看。

分析方法:
按邮件里所述方法分别计算红、绿色荧光直方图(histogram)的数学均值(AM),以表示细胞群的平均荧光强度。计算Ratio值(Ration=AM红/AM绿),反映线粒体膜电位的平均水平。


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附件
2012-3-20 12:48
20003589.snap.jpg (35.27 KB)
 
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hulu呼噜[使用道具]
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.....
用FL2的平均荧光强度值/FL1的平均荧光强度值评价线粒体损伤情况,值越高,损伤越利害。

—————————————————————————————————————————————————————————————————

好像弄反了吧?

FL2采集的是J-aggregates(富集于线粒体)的红色荧光,FL1采集的是JC-1 monomer(胞浆中)的绿色荧光。线粒体损伤时应该是J-aggregates减少而JC-1 monomer增多,应红色荧光减弱而绿色荧光增强,故上述值越低,损伤越利害。
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不好意思。
的确是我弄反了。
那么楼主的结果是正确的。可以直接分析了。
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我觉得LZ用象限区分阴性和阳性区域来呈现结果是正确的做法。

参见陈朱波,曹雪涛 所著《流式细胞术》(科学出版社);梁智辉 等所著,《流式细胞术基本原理与使用方法》(华中科技大学出版社)
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