[求助]细胞瓶底有贴壁小亮点

最新回复

• u234 (2012-3-24 13:00:44)

  
  应该不是细菌，培养基不是很快变黄，并且小亮点是贴壁的，不会动，但能消化下来。

  
  99652935.snap.jpg

• 缘yuan (2012-3-24 13:01:55)

  
  见过的类似情况要么是真菌污染 要么是细胞凋亡太多形成的凋亡小体
  要是小亮点连成串珠状 肯定是真菌污染，要是散开大小不一有可能是凋亡小体， 一般细菌污染看不到小亮点，细菌没那么大 大肠杆菌镜下看起来就是些很微小的黑丝

• 缘yuan (2012-3-24 13:02:22)

  
  如果你的图片上显示的连在一起那种小点不是你的细胞， 那肯定是真菌污染了 真菌污染很麻烦 双抗搞不的

• dragonkilly (2012-3-24 13:02:46)

  
  lz，我也遇到了和你类似的情况~
  复苏了以前冻存的细胞，刚开始状态还不错，等传了一代后就出问题了，生长速度很缓慢，部分地方由于细胞死亡而形成空白，培养液表面漂浮了很多透明远点，但是好像不是成念珠连在一起。
  求问达人们到底是什么情况
  晚上有时间了上几张图~

• wu11998866 (2012-3-24 13:03:38)

  
  感觉小亮点是贴壁的，晃动培养瓶小亮点不会跟着动，能够被消化下来，不连在一起，是散开的。我们养了5种细胞，其中2种出现了这种情况，其他的还一直没事。

• wu11998866 (2012-3-24 13:04:13)

  
  连在一起、大的是SW620细胞，背景中很多小的亮点不知是咋回事。

• ha111 (2012-3-24 13:04:50)

  我以前养细胞也出现过这种情况，想想是不是培养液使用太久，反复冻溶有害物质就出来了。培养液配制越新越好，一般使用不要超过一周

• guagua (2012-3-24 13:05:18)

  
  应该是污染了，我以前也养过这样的。冻存前是好的，复苏后就出现污染的情况。

• 小螺号 (2012-3-24 13:05:40)

  
  你就多养几天，细菌污染一般三天培养基就会变得混浊，而且在显微镜下可以观察到细菌在动。常见的真菌一般要比你养的细胞小，像真菌白色念珠球菌和你描述的亮点应该差不多大小，刚开始是小棒状或是椭圆的，分裂时会拉长，串状..,且静止不动。
  如果比较分散，如楼上的一位兄弟所说，是凋亡小体，反光度很高，细胞凋亡是程序性死亡，如果你里面有巨噬细胞的话，可以看到小亮点会着附在巨噬细胞上，板底干净，各细胞生长良好。
  细胞凋亡早期会形成一些“芽体”，是内质网不断扩张并与胞膜融合，形成膜表面的芽状突起，称为出芽，比后期形成的凋亡小体要大，所以你最好看看有没有个别介于细胞和小亮点之间的“亮点”。

• 3648755 (2012-3-24 13:07:45)

  
  细菌污染的话，培养液会很快变浑变黄，楼主的细胞不排除支原体感染

• 小螺号 (2012-3-24 13:09:02)

  
  是啊，且支原体污染一般很难看到培养基变浑浊，但是细胞会慢慢的死去。支原体光学显微镜下也很难看到，支原体太小了，一般染色才能确定。

• 阿敏 (2012-3-24 13:09:29)

  
  建议楼主换培养液试下，看看是否还有这样的小亮点。之前请我们养的细胞也出现过类似的情况，换了几次培养液以后就慢慢的消失，具体的原因还不是很清楚。

• fei1226com (2012-3-24 13:10:49)

  
  这个图片显示细胞状态不太正常，我养过sw620和sw480细胞，前者是有部分呈圆形状态，但是无论如何也应该有贴壁伸展状态的细胞，图片里好像看不见，另外，图片中有些小圆点肯定是不正常状态，我养的这个细胞没见过这类状况，实验人员最好重新复苏细胞再试试。

• 小螺号 (2012-3-24 13:11:07)

  很感谢战友们的热心解答！小亮点的反光度很高，分散，很象焉知水寒所说的凋亡小体。应该如何避免呢？等检验一下支原体。但是我们5株细胞都是一起传代的呀，有可能只有2株细胞感染，其他的没事吗？

• jrwyyplt (2012-3-24 13:11:23)

  
  是不是酵母污染啊

• remenb (2012-3-24 13:12:47)

  细胞沙化是什么？有高人回答吗？
  我养人的BMSCs,如果志愿者的年龄很大，分出的细胞养了一段时间后就会出现细胞形态很宽大，细胞之间的分界不是很明显，镜下见细胞内似乎有小颗粒，开始以为是污染了，但是接着养也不会有培养基变黄灯现象。细胞生长较慢。
  养鼠的BMSCs时出现过开始时很好，后来出现类似的情况。有人说是细胞老化，也没找到细胞老化是怎么一回事。
  楼主提到沙化，不知道是不是我遇到的这种情况，借楼主宝地，盼高人解答。

• 33号 (2012-3-24 13:13:45)

  
  你用的培养平板还是克隆瓶？

• any333 (2012-3-24 13:14:15)

  
  我觉得最可能还是支原体感染。
  
  支原体感染的细胞最后看起来都差不多。晚期凋亡或死亡的样子。细胞间很多黑点，调焦过程中也可以显示成亮点。

• remenb (2012-3-24 13:14:53)

  
  我养的细胞也有这种问题，组织块旁边总有很多亮亮的小点，有的培养瓶里组织块还能爬出细胞，有的完全长不出细胞。换液后仍然有，不知道什么原因。

• eric930 (2012-3-24 13:15:54)

  
  瞧着像是真菌感染了，它是浮于贴壁细胞之上的。可以多观察几日，培养液是否变浑，或者贴壁细胞的变化。请在三天，再扫个片，传上来，告诉我们结果。